MBD2缺失通過減少M2型巨噬細胞的極化保護博來霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化.pdf

1、特發(fā)性肺纖維化(IPF)是慢性進行性肺疾病，以肺間質(zhì)與肺泡腔內(nèi)纖維化和炎性細胞浸潤混合存在為病理特征，會導(dǎo)致過度的細胞外基質(zhì)(ECM)累積，并最終造成呼吸衰竭。盡管已經(jīng)確認遺傳因素與環(huán)境因素是其危險因素，但具體病因與致病機制還不清楚。表觀遺傳學(xué)是與DNA序列無關(guān)的基因表達可遺傳變化，DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學(xué)機制，其改變通常發(fā)生于機體對外界環(huán)境作出反應(yīng)時調(diào)控基因表達。DNA甲基化組的改變通過一種保守的甲基-CpG-結(jié)合域(MBD

2、)蛋白家族解讀，如 MBD2，其與甲基化 DNA的結(jié)合能力最強。
　　目的：探討MBD2在肺纖維化中的作用及其可能的機制。
　　方法：在人體組織中運用免疫熒光檢測IPF患者的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中MBD2的表達。在動物實驗中以氣道滴注博來霉素(BLM)的方法建立肺纖維化模型。WT小鼠與MBD2-/-小鼠隨機分為四組：WT小鼠+生理鹽水組，WT小鼠+BLM組，MBD2-/-小鼠+生理鹽水組，MBD2-/-小鼠+BLM組

3、。用HE，天狼星紅與Masson染色評價肺損傷與纖維化程度。qPCR和Western Blot分別檢測野生型小鼠和MBD2-/-小鼠中MBD2的表達。qPCR與Western Blot檢測肺組織中collagen I， fibronectin，TGF-β1，F(xiàn)IZZ1，CD206，Arg-1，SOCS1與 SOCS3的表達量。細胞實驗中，提取WT小鼠與MBD2-/-小鼠的腹腔巨噬細胞，IL-4或PBS分別刺激24小時，qPCR檢測刺激前

4、后FIZZ1，CCL17，SOCS1與SOCS3的表達水平。
　　結(jié)果：IPF患者的BALF中，MBD2高表達于浸潤的M2型巨噬細胞。動物實驗中，發(fā)現(xiàn) MBD2在肺纖維化模型中明顯升高，組織學(xué)分析顯示 BLM處理組中MBD2-/-小鼠的肺損傷與纖維化程度輕于 WT小鼠；MBD2-/-小鼠肺組織中collagen I，fibronectin，TGF-β1，F(xiàn)IZZ1，CD206，Arg-1的表達水平低于WT小鼠，而SOCS1與SOC