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文檔簡介
1、目的:研究芹菜素抑制博來霉素誘導(dǎo)小鼠肺纖維化作用,并探討其可能的作用機(jī)制。
方法:體內(nèi)實驗使用ICR雄性小鼠,除正常對照組小鼠氣管內(nèi)滴注等體積生理鹽水外,其他小鼠使用博來霉素進(jìn)行氣管內(nèi)滴注造模,隨后分為模型組,芹菜素150和300 mg/kg組,以及陽性藥地塞米松0.125 mg/kg組。給藥組小鼠連續(xù)灌胃給藥28天,處死后檢測血清和肺組織中的氧化和抗氧化指標(biāo)、肺組織中的羥脯氨酸含量以及肺組織的形態(tài)學(xué)改變。用Western b
2、lot法測定了肺組織中的過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)、核因子κB p65(NF-κB p65)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、Smad-7、E-cadherin和Vimentin蛋白的表達(dá)。體外實驗選用肺泡上皮細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞,分為對照組、TGF-β1刺激組、芹菜素(2.5,5,10μM)三個濃度組和陽性藥羅格列酮(10μM)組,藥物作用細(xì)胞24h后檢測上皮特征蛋白E-cadher
3、in水平的變化,同時測定細(xì)胞中PPARγ和NF-κB p65蛋白表達(dá)的變化。
結(jié)果:在體內(nèi)動物實驗中,連續(xù)給予芹菜素150-300mg/kg28天后,可見肺重、肺重系數(shù)和肺組織中的羥脯氨酸含量降低,顯微鏡下可見肺組織中的炎癥細(xì)胞減少,肺泡壁厚度降低,纖維化程度減輕,尤以芹菜素300 mg/kg效果更為明顯。芹菜素可降低小鼠血清中的丙二醛(MDA)含量,增加超氧化物歧化酶(SOD)水平,同時芹菜素也可增加肺組織中的SOD和谷胱甘
4、肽(GSH)水平。給予芹菜素的小鼠,肺組織中的PPARγ、Smad-7和E-cadherin蛋白表達(dá)增加,而NF-κBp65、TGF-β1、MMP-9和Vimentin蛋白表達(dá)降低。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞實驗中,TGF-β1誘導(dǎo)的A549細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)過程中,芹菜素5-10μM作用24h后,可顯著地增加A549細(xì)胞上皮特征蛋白E-cadherin的表達(dá),同時也可增加PPARγ的蛋白表達(dá),抑制NF-κBp65的蛋白表達(dá)。
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