消退素D1在博來霉素肺纖維化小鼠中的抗纖維化作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　探討RvD1對(duì)C57BL/6小鼠博來霉素肺纖維化的作用和機(jī)制。在體模型，觀察RvD1對(duì)小鼠肺組織炎癥、膠原纖維形成的影響，并對(duì)纖維化相關(guān)通路進(jìn)行研究。在細(xì)胞水平，TGF-β1刺激肺原代成纖維細(xì)胞增殖，探討RvD1對(duì)TGF-β1引起的增殖、膠原纖維表達(dá)及其下游傳導(dǎo)通路的影響。
　　方法:
　　將C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組及RvD1組。模型組以BLM氣管內(nèi)注入建立;對(duì)照組氣管內(nèi)注入相同劑量的生理鹽

2、水;RvD1組，氣管內(nèi)注入BLM后于4d、7d、14d腹腔注射RvD1進(jìn)行干預(yù)治療，第21天將小鼠處死取肺組織進(jìn)行檢測(cè)。HE染色觀察肺組織炎癥程度;ELASA檢測(cè)細(xì)胞因子TGF-β1的表達(dá)，Masson染色半定量檢測(cè)膠原蛋白沉積，免疫組化（SP法）檢測(cè)α-SMA，CollagenⅠ(ColⅠ)以及Fibronectin(FN)含量，Western Blot進(jìn)一步定量檢測(cè)α-SMA、ColⅠ及FN的表達(dá)，最后對(duì)纖維化相關(guān)通路AKT、ERK

3、、P38MAPK及JNK通路進(jìn)行檢測(cè)。
　　體外實(shí)驗(yàn)，TGF-β1刺激C57BL/6小鼠原代肺成纖維細(xì)胞增殖，用RvD1進(jìn)行干預(yù)。CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖，Western Blot檢測(cè)細(xì)胞α-SMA、ColⅠ及FN的表達(dá)，最后細(xì)胞上進(jìn)一步用Western Blot對(duì)相關(guān)通路AKT、ERK、P38MAPK及JNK進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果:
　　1.動(dòng)物模型中，RvD1能夠明顯抑制肺部的炎癥反應(yīng)，降低TGF-β1的表達(dá)水平;此外

4、，RvD1還能夠抑制細(xì)胞外基質(zhì)沉積，減少α-SMA、ColⅠ及FN的表達(dá)，從而抑制BLM引起的纖維化。RvD1還能夠抑制相關(guān)通路AKT、ERK、P38MAPK及JNK的磷酸化。
　　2.體外實(shí)驗(yàn)中，TGF-β1可刺激原代成纖維細(xì)胞增殖，RvD1能夠抑制此增殖反應(yīng)。同時(shí)，RvD1還能夠抑制TGF-β1引起的膠原纖維形成，抑制AKT、ERK、P38MAPK及JNK通路的磷酸化。
　　結(jié)論:
　　RvD1可抑制炎癥、抑制膠原