2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩58頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、本實驗旨在探索有效的染色前固定和滲透卵母細(xì)胞及早期胚胎的方法,以提高小鼠卵母細(xì)胞和早期胚胎免疫熒光染色的效果;同時檢測RNA聚合酶II(PolII)在小鼠卵母細(xì)胞和早期胚胎的表達(dá),探討PolII在卵母細(xì)胞和早期胚胎發(fā)育中的作用。為大規(guī)模地精確檢測小鼠卵母細(xì)胞和胚胎中的蛋白質(zhì)與轉(zhuǎn)錄因子打下堅實基礎(chǔ)。 以小鼠卵母細(xì)胞和早期胚胎為試驗材料,采用4種不同的固定及滲透方法處理。方案A:先用4%多聚甲醛(PFA)固定1h,再用0.5%Tri

2、tonX-100穿透10min;方案B:先用0.5%TritonX-100穿透10min,再用4%PFA固定1h;方案C:用1%PFA+0.2%TritonX-100同時固定與穿透1h;方案D:用-20℃預(yù)冷甲醇固定15min,再用0.5%TritonX-100孵育10rain。分析10種轉(zhuǎn)錄因子(TFIIA、TFIIB、TAF1、TAF4、PolII、BRF1、MeCP2、MBD2ab、HP1α及HP1β)在小鼠卵母細(xì)胞中的免疫熒光染

3、色效果。結(jié)果表明,C方案能夠完全檢測并標(biāo)記出10種轉(zhuǎn)錄因子的熒光信號,其它3種方案都只能檢測出部分轉(zhuǎn)錄因子的熒光信號;對熒光信號精細(xì)分布模式與動態(tài)變化最典型的TFIIB進(jìn)行仔細(xì)分析,表明經(jīng)C方案處理后10種轉(zhuǎn)錄因子抗體標(biāo)記信號的分布模式很精細(xì),熒光信號的分布清晰,能觀察到信號隨細(xì)胞核成熟而發(fā)生的動態(tài)變化,卵母細(xì)胞的形態(tài)完好;其它3種方案處理后卵母細(xì)胞中雖然能夠觀察到核仁,也能觀察到信號基本均勻地分布于核區(qū),但不能清楚地顯示熒光信號在核仁

4、內(nèi)是否有分布及信號的動態(tài)變化過程,熒光染色效果不理想。 在光鏡下觀察4種方案處理后的卵母細(xì)胞,著重比較GV期、MI期、MII期的卵母細(xì)胞和2-細(xì)胞期胚胎形態(tài),C方案處理后的卵母細(xì)胞形態(tài)保存較好,GV期細(xì)胞核和核仁結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞質(zhì)均勻分布,形態(tài)飽滿;MI期透明帶緊實清晰,厚薄均勻,胞質(zhì)的顆粒狀突起明顯;MII期第一極體結(jié)構(gòu)和2.細(xì)胞期的極體結(jié)構(gòu)都保存完好。其它3種方案處理后卵母細(xì)胞的形態(tài)變形,各發(fā)育時期的核仁、透明帶、極體等結(jié)構(gòu)受

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論