(一)hsTRAIL蛋白的表達與復性研究;(二)重組枯草芽胞桿菌谷氨酰胺合成酶的誘導表達與培養(yǎng)基優(yōu)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了獲得有活性的hsTRAIL蛋白,本實驗對hsTRAIL包含體進行了復性的研究。通過對hsTRAIL包涵體洗滌條件的研究,使蛋白純度提高到90%以上,并確定了其簡單適宜的復性方法,純度達98%。采用稀釋法可使得近65%的蛋白恢復可溶性,而透析法也能獲得33%的可溶性蛋白。本實驗中,我們對稀釋復性的 hsTRAIL蛋白進行了生物學活性的測定。結果顯示:復性后的hsTRAIL蛋白能誘導Hela細胞凋亡,而對正常的人胚腎細胞293細胞無影響

2、,實驗結果與國外文獻報道的結果相一致,表明復性后的hsTRAIL蛋白具有良好的生物學活性。 以重組枯草芽孢桿菌谷氨酰胺合成酶.(L-谷氨酸:氨連接酶,Glutamine Synthetase,GS EC 6.3.1.2)蛋白表達宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作為研究對象,借助SDS PAGE分析方法,對于用乳糖誘導由T71ac啟動子控制的重組目的產物蛋白的各種基本參數進行了初步的研究。研究了最佳誘導起始生

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