2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  在腦缺血再灌注后半暗帶區(qū)神經(jīng)細胞凋亡中溶酶體組織蛋白酶L(Cathepsin L)與磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路均發(fā)揮了重要作用,但關(guān)于兩者在缺血性腦卒中半暗帶區(qū)之間的聯(lián)系研究甚少。通過建立大鼠大腦中動脈腦缺血再灌注損傷模型,運用Western blotting檢測大鼠腦缺血半暗帶各相應時間點Cath

2、epsin L及p-Akt蛋白表達的動態(tài)變化,同時使用Cathepsin L的特異性抑制劑Z-FY-DMK及PI3K/Akt的特異性抑制劑LY294002分別進行干預,觀察蛋白的表達變化,探討Cathepsin L與p-Akt之間的關(guān)系。
  方法:
  選取周齡為10-12周的清潔級健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠85只,體重為280±20g,依據(jù)隨機數(shù)字表法將大鼠隨機分為假手術(shù)組(Sham組)10只;腦缺

3、血再灌注組(IRI組)25只;Cathepsin L抑制劑 Z-FY-DMK干預組(CLI組)25只;PI3K-Akt抑制劑LY294002干預組(LY組)25只,IRI組、CLI組及 LY組大鼠分別按3h、6h、12h及24h四個時間點每個時間點每組5只隨機分為四個亞組。采用改良longa線栓法制作大鼠大腦中動脈缺血再灌注損傷模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),CLI組、LY組分別于術(shù)前

4、30min側(cè)腦室穿刺注入 Z-FY-DMK(20ug/1ul*5ul)及LY294002(25μg,5μl DMSO),Sham組及IRI組于術(shù)前30分鐘側(cè)腦室注入濃度為10ml/L的DMSO5ul。對大鼠運用Longa’s5級標準評分法評分;TTC染色檢測各組大鼠24h時間點相對腦梗死體積;Western blotting法檢測半暗帶區(qū)相應時間點Cathepsin L、p-Akt及24h組Caspase3的蛋白表達變化。
  結(jié)

5、果:
  1.造模成功率是83.33%。Sham組大鼠未見神經(jīng)功能缺損癥狀;IRI組、CLI組、LY組大鼠均可見神經(jīng)功能缺損癥狀;與IRI組相比,CLI組大鼠腦神經(jīng)功能缺損評分較低,LY組大鼠腦神經(jīng)功能缺損評分較高(P<0.05)。
  2.TTC染色檢測 Sham組大鼠腦組織未見白色梗死灶,IRI組、CLI組、LY組缺血側(cè)皮質(zhì)均可見蒼白色梗死灶,CLI組大鼠腦梗死體積較IRI組減小,LY組大鼠腦梗死體積較IRI組增加(P﹤

6、0.05)。
  3.Western blotting檢測到Sham組大鼠缺血側(cè)大腦視前區(qū)皮質(zhì)可見Cathepsin L蛋白少許表達,IRI組Cathepsin L在大鼠腦缺血再灌注后3h、6h、12h呈上升趨勢,12h達到高峰,24h下降,均高于Sham組(P﹤0.05);CLI組各相應時間點Cathepsin L蛋白的表達較IRI組表達減少(p<0.05);LY組Cathepsin L表達在再灌注后3h、6h、12h呈上升趨勢

7、,12h到達高峰,24h下降,各相應時間點Cathepsin L蛋白表達較 IRI組增加(p<0.05)。Sham組大鼠缺血側(cè)大腦視前區(qū)皮質(zhì)可見p-Akt蛋白少許表達,IRI組p-Akt蛋白表達在大鼠腦缺血再灌注后3h達高峰,6h、12h有下降,24h再度升高;CLI組p-Akt蛋白表達在再灌注后3h、6h、12h、24h呈持續(xù)增高趨勢,3h、6h較IRI組相應時間點減少,12h、24h較IRI組相應時間點增高(p<0.05);LY組p

8、-Akt蛋白表達在3h達高峰,6h、12h有下降,24h再度上升,各相應時間點較IRI組都有減少(p<0.05)。
  4.Western blotting檢測各實驗組大鼠缺血側(cè)大腦皮質(zhì)視前區(qū)24h時間點caspase3蛋白表達:Sham組幾乎不表達,IRI組、CLI組、LY組明顯表達,CLI組較IRI組表達少(P<0.05),LY組較IRI組表達增加(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.大鼠腦缺血再灌注損傷后,大鼠

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