大鼠短暫局灶性腦缺血再灌注后P-Akt的表達及氯化鋰對其的干預作用.pdf

1、目的：研究腦缺血損傷后鋰鹽的短期治療作用，在SD大鼠短暫局灶性腦缺血再灌注損傷后，(1)比較不同劑量短期氯化鋰治療對海馬P-Akt表達的影響；(2)觀察3mmol/kg氯化鋰短期治療后，大鼠海馬不同時間點P-Akt表達的變化，及鋰的干預對神經元的保護作用；(3)探討氯化鋰對腦缺血損傷保護作用的部分機制。 材料和方法：使用血管內線栓法造成大鼠右側大腦中動脈閉塞(MCAO)制作短暫局灶性腦缺血再灌注模型，MCAO1.5h后再灌注。

2、 在實驗1中，SD大鼠按氯化鋰(LI)治療劑量的不同隨機分為5個亞組：LI0組(0mmol/kg)、LI0.5組(0.5mmol/kg)、LI1組(1mmol/kg)、LI3組(3mmol/kg)、LI5組(5mmol/kg)，在腦缺血損傷后第2d處死。用westernBlotting法檢測大鼠右側海馬區(qū)P-Akt的表達。 實驗2中，將SD大鼠隨機分為正常對照組(NC組)、假手術組(SH組)、缺血再灌注組(IR組)和缺血再

3、灌注后氯化鋰治療組(LI組，LI=3mmol/kg)。缺血損傷后6h、1d、2d、3d取腦，運用WesternBlotting法比較IR組和LI組的P-Akt的蛋白表達。于缺血損傷后1d、2d、3d取腦，運用TTC染色測算腦梗死體積，HE染色比較各組海馬CA1區(qū)神經元損傷程度，運用免疫組化染色法觀察各組海馬CA1、CA3中P-Akt的表達，采用圖像分析處理系統(tǒng)計算其蛋白表達平均矯正光密度值。 LI組在缺血后1h予氯化鋰腹腔注射，

4、每天一次至處死，IR組、NC組、SH組均以生理鹽水替代。每個亞組6只動物。 結果：(1)實驗1，WesternBlotting法與其他治療劑量組相比較，氯化鋰短期治療2天，3mmol/kg劑量治療組的P-Akt表達量最高；(2)實驗2，①WesternBlotting法兩組皆在腦缺血6h后檢測到P-Akt的存在，同一時間段的LI組較IR組P-Akt表達量明顯上調(P＜0.05或P＜0.01)。②TTC染色運用氯化鋰治療后可明顯減

5、輕缺血再灌注后腦組織損傷，LI1d、LI2d、LI3d組較相同時間點IR組腦梗死體積分別減少42.9﹪、31.8﹪、32.4﹪(P＜0.01)；③HE染色損傷后IR組和LI組CA1區(qū)存活錐體細胞數(shù)均逐漸下降，LI組海馬CA1區(qū)神經元損傷程度，均較相同時間點的IR組減輕，且LI2d組、LI3d組較IR2d組、IR3d組存活錐體細胞數(shù)明顯增多(P＜0.01)；④免疫組化LI組海馬CA1、CA3區(qū)P-Akt蛋白表達平均矯正光密度值均較IR組、