大鼠短暫局灶性腦缺血再灌注后P-Akt的表達(dá)及氯化鋰對(duì)其的干預(yù)作用.pdf

1、目的：研究腦缺血損傷后鋰鹽的短期治療作用，在SD大鼠短暫局灶性腦缺血再灌注損傷后，(1)比較不同劑量短期氯化鋰治療對(duì)海馬P-Akt表達(dá)的影響；(2)觀察3mmol/kg氯化鋰短期治療后，大鼠海馬不同時(shí)間點(diǎn)P-Akt表達(dá)的變化，及鋰的干預(yù)對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用；(3)探討氯化鋰對(duì)腦缺血損傷保護(hù)作用的部分機(jī)制。 材料和方法：使用血管內(nèi)線栓法造成大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)制作短暫局灶性腦缺血再灌注模型，MCAO1.5h后再灌注。

2、 在實(shí)驗(yàn)1中，SD大鼠按氯化鋰(LI)治療劑量的不同隨機(jī)分為5個(gè)亞組：LI0組(0mmol/kg)、LI0.5組(0.5mmol/kg)、LI1組(1mmol/kg)、LI3組(3mmol/kg)、LI5組(5mmol/kg)，在腦缺血損傷后第2d處死。用westernBlotting法檢測(cè)大鼠右側(cè)海馬區(qū)P-Akt的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)2中，將SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)、假手術(shù)組(SH組)、缺血再灌注組(IR組)和缺血再

3、灌注后氯化鋰治療組(LI組，LI=3mmol/kg)。缺血損傷后6h、1d、2d、3d取腦，運(yùn)用WesternBlotting法比較IR組和LI組的P-Akt的蛋白表達(dá)。于缺血損傷后1d、2d、3d取腦，運(yùn)用TTC染色測(cè)算腦梗死體積，HE染色比較各組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷程度，運(yùn)用免疫組化染色法觀察各組海馬CA1、CA3中P-Akt的表達(dá)，采用圖像分析處理系統(tǒng)計(jì)算其蛋白表達(dá)平均矯正光密度值。 LI組在缺血后1h予氯化鋰腹腔注射，

4、每天一次至處死，IR組、NC組、SH組均以生理鹽水替代。每個(gè)亞組6只動(dòng)物。 結(jié)果：(1)實(shí)驗(yàn)1，WesternBlotting法與其他治療劑量組相比較，氯化鋰短期治療2天，3mmol/kg劑量治療組的P-Akt表達(dá)量最高；(2)實(shí)驗(yàn)2，①WesternBlotting法兩組皆在腦缺血6h后檢測(cè)到P-Akt的存在，同一時(shí)間段的LI組較IR組P-Akt表達(dá)量明顯上調(diào)(P＜0.05或P＜0.01)。②TTC染色運(yùn)用氯化鋰治療后可明顯減

5、輕缺血再灌注后腦組織損傷，LI1d、LI2d、LI3d組較相同時(shí)間點(diǎn)IR組腦梗死體積分別減少42.9﹪、31.8﹪、32.4﹪(P＜0.01)；③HE染色損傷后IR組和LI組CA1區(qū)存活錐體細(xì)胞數(shù)均逐漸下降，LI組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷程度，均較相同時(shí)間點(diǎn)的IR組減輕，且LI2d組、LI3d組較IR2d組、IR3d組存活錐體細(xì)胞數(shù)明顯增多(P＜0.01)；④免疫組化LI組海馬CA1、CA3區(qū)P-Akt蛋白表達(dá)平均矯正光密度值均較IR組、