BPD新生鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子CHOP及自噬相關(guān)蛋白LC3B表達(dá)的研究.pdf

1、目的:
　　探討高氧致新生大鼠支氣管肺發(fā)育不良(BPD)發(fā)生過程中肺組織ERS相關(guān)因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、ATF4及自噬標(biāo)志物L(fēng)C3B在BPD中的作用及CHOP與LC3B二者之間是否存在相互作用。
　　研究方法:
　　80只新生大鼠隨機(jī)分為模型組(FiO2=80％-85％)和對(duì)照組(FiO2=21％)。兩組新生鼠分別于1d、7d、14d、21d隨機(jī)處死，采集肺組織標(biāo)本，采用輻射狀肺泡計(jì)數(shù)(RAC)和肺泡間隔

2、厚度評(píng)價(jià)肺泡發(fā)育程度，透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)改變，免疫組織化學(xué)觀察肺組織ATF4、 CHOP、LC3B定位及分布，免疫熒光觀察肺組織CHOP、LC3B的共定位，RT-PCR、Western blot檢測(cè)ATF4、CHOP、LC3B基因及蛋白表達(dá)水平，Pearson相關(guān)分析用于CHOP、LC3B-Ⅱ蛋白的相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:
　　模型組RAC值從7d開始低于對(duì)照組，持續(xù)至21 d(P＜0.05)，肺泡間隔厚度從7d開始高于對(duì)

3、照組，21d達(dá)最高(P＜0.05);TEM觀察到模型組14dAECⅡ板層小體破壞，細(xì)胞內(nèi)存在明顯的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張和自噬現(xiàn)象;與對(duì)照組相比，模型組ATF4、CHOP、LC3B蛋白明顯升高，于7d開始升高，14d達(dá)峰(P＜0.05);與對(duì)照組相比，模型組CHOP、LC3B mRNA表達(dá)水平較低（7d、14d、21d P＜0.05）;模型組14d肺組織內(nèi)可見CHOP、LC3B的共定位細(xì)胞;Pearson相關(guān)性分析表明，模型組CHOP蛋白和LC3B