MafA磷酸化在胰島素基因表達(dá)中的作用.pdf

1、目的：(1)探討不同糖濃度培養(yǎng)條件下大鼠胰島素1(insulin1，INS-1)細(xì)胞中MafA蛋白和胰島素基因的表達(dá)變化，觀(guān)察MafA在葡萄糖調(diào)節(jié)胰島素基因表達(dá)中的作用；(2)檢測(cè)GSK3抑制劑處理后大鼠INS-1細(xì)胞中MafA蛋白和胰島素基因的表達(dá)變化，研究MafA磷酸化在調(diào)控胰島素基因表達(dá)中的作用；
　　 方法：將INS-1細(xì)胞在不同濃度的葡萄糖或GSK3抑制劑中培養(yǎng)24小時(shí)后，分別應(yīng)用Western Blot方法或RT-P

2、CR技術(shù)檢測(cè)INS-1細(xì)胞中MafA蛋白和胰島素基因的表達(dá)情況；
　　 結(jié)果：(1)大鼠INS-1細(xì)胞在3mmol/L、7 mmol/L、11.1 mmol/L、20 mmol/L的葡萄糖中培養(yǎng)24h后，高糖組(11.1mmol/L和20mmol/L)與低糖組(3mmol/L和7mmol/L)相比，前者完全磷酸化形式的MafA(p-MafA)和insulin2 mRNA表達(dá)均降低(P＜0.05)，而insulin1 mRNA表達(dá)

3、無(wú)顯著差異(P＞0.05)。(2)大鼠INS-1細(xì)胞在0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的GSK3抑制劑中培養(yǎng)24h后，50μmol/L和100μmol/L的GSK3抑制劑組與對(duì)照組(0μmol/L)相比，MafA蛋白完全磷酸化形式降低(P＜0.05)，低磷酸化形式顯著增加(P＜0.05)；同時(shí)insulin2 mRNA表達(dá)均顯著降低(P＜0.01)，分別下降了31.45％和46.77％，insulin1 mRNA表達(dá)