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1、目的:1、通過(guò)對(duì)南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院念珠菌血癥患者的病原真菌的分離、分子鑒定及對(duì)抗真菌藥物的藥物敏感性試驗(yàn),了解江西省念珠菌血癥患者中,各念珠菌的構(gòu)成比及對(duì)抗真菌藥物的耐藥狀況,指導(dǎo)臨床抗真菌藥物的使用;2、利用多位點(diǎn)序列分型(MLST)對(duì)念珠菌血癥的常見(jiàn)致病菌白念珠菌和熱帶念珠菌進(jìn)行基因分型。了解對(duì)江西省念珠菌血癥致病性真菌的流行病學(xué)特征。
方法:收集血培養(yǎng)陽(yáng)性且在顯微鏡下可觀察到細(xì)長(zhǎng)菌絲或芽孢或假菌絲等真菌形態(tài)的標(biāo)本。
2、將標(biāo)本用沙保弱葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng),分離、純化菌株,挑取平板上出現(xiàn)白色或乳白色表面光滑略有粘性菌落。用科瑪嘉顯色培養(yǎng)基進(jìn)行菌株的初步篩選,保存菌株。用擴(kuò)增真菌的轉(zhuǎn)錄間隔間區(qū)(ITS區(qū))和核糖體大亞基(26rRNA、D1/D2區(qū))、基因測(cè)序?qū)Τ鹾Y的菌株進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的分子生物學(xué)鑒定;然后,利用美國(guó)臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化研究所頒布的微量液基稀釋法抗真菌藥物敏感試驗(yàn)方案M27-A3測(cè)定這些菌株對(duì)常見(jiàn)抗真菌藥物的敏感性。利用多位點(diǎn)序列分型(MLST)對(duì)念珠菌
3、血癥的常見(jiàn)致病菌白念珠菌和熱帶念珠菌進(jìn)行基因分型。
結(jié)果:共收集52株念珠菌血癥的病原真菌,其中熱帶念珠菌17株,占32.7%;白念珠菌16株,占30.8%;近平滑念珠菌復(fù)合體16株,占30.8%;光滑念珠菌3株,占5.7%。16株近平滑復(fù)合體包括14株近平滑念珠菌和2株擬近平滑念珠菌,分別占26.9%、3.9%。6株念珠菌(1株白念珠菌、5株熱帶念珠菌)對(duì)氟康唑耐藥;7株念珠菌(4株白念珠菌、3株熱帶念珠菌)對(duì)伊曲康唑?yàn)榉且?/p>
4、生型;5株念珠菌(1株白念珠菌、3株熱帶念珠菌、1株光滑念珠菌)對(duì)伏立康唑耐藥;4株念珠菌(3株白念珠菌、1株熱帶念珠菌)對(duì)泊沙康唑?yàn)榉且吧停?株念珠菌屬(1株白念珠菌、1株熱帶念珠菌)同時(shí)對(duì)氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑耐藥。17熱帶念珠菌產(chǎn)生13個(gè)新的二倍體序列型。16個(gè)白念珠菌產(chǎn)生16個(gè)新的二倍體序列型。
結(jié)論:1.白念珠菌、熱帶念珠菌和近平滑念珠菌仍是念珠菌血癥的主要致病菌。在江西省熱帶念珠菌是念珠菌血癥的最常見(jiàn)致病菌。
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