免疫磁珠分離人骨髓基質(zhì)干細胞的實驗研究.pdf

1、目的利用免疫磁珠快速分離、純化同質(zhì)性成人骨髓基質(zhì)干細胞。 方法采集正常成人骨髓，經(jīng)淋巴細胞分離液分離出骨髓單個核細胞(MNCs)并培養(yǎng)擴增，應用免疫磁珠從MNCs中分離出Stro-1<'+>細胞，對其進行形態(tài)學、生物學特性方面的測定與分析，并與傳統(tǒng)貼壁培養(yǎng)法獲得的BMSCs相比較。通過流式細胞儀檢測Stro-1<'+>細胞表面標記及細胞周期分布：通過相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)；通過繪制細胞貼壁率曲線、生長曲線、體外擴增曲線了解其體外

2、生長情況及擴增能力；通過誘導成骨后堿性磷酸酶染色、Von Kossa 染色及 X 線衍射分析了解其成骨能力。 結(jié)果利用免疫磁珠可從成人骨髓中獲取骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)。與貼壁法獲得的BMSCs相比較，獲得的細胞克隆單一，幾乎無圓形細胞夾雜，貼壁率高，生長狀況良好，體外擴增可達10<'6>～10<'7>數(shù)量級。免疫磁珠分離法對BMSCs細胞周期無明顯影響，其分離所得的BMSCs在成骨誘導培養(yǎng)條件下具有良好的成骨分化能力。