環(huán)境煙霧暴露誘發(fā)特定機體損傷的動物模型研究.pdf

1、目的：香煙煙霧是室內空氣環(huán)境的主要污染物之一，誘發(fā)了多種疾病。其化學成分極其復雜，目前通常采用Ames試驗、微核分析、中性紅細胞毒性試驗等體外方法進行毒性分析，探索誘發(fā)特定機體損傷的動物模型評價方法已成為當務之急。本文參考國際煙草科學研究合作中心（CORESTA）推薦的方法，以不同品種的煙草卷制的單料煙為材料，通過體外 Ames試驗和煙熏 SD大鼠構建慢性阻塞性肺疾?。–OPD）動物模型，旨在為揭示復雜環(huán)境空氣污染物的毒性機制與健康危害

2、提供理論依據。
　　方法：對3個煙草品種CS-1、CS-2和CS-3，利用Ames試驗分析其煙霧提取物（CSE）對TA97、TA98、TA100和TA102標準測試菌株的基因毒性；將清潔級雄性SD大鼠隨機分為對照組和實驗組（CS-1、CS-2和CS-3），連續(xù)煙熏8周構建COPD模型。分別于暴露14、28和56 d后，H.E.染色觀察肺組織和氣管的病理學和形態(tài)學變化；檢測肺組織（ROS、SOD、GSH-Px、MDA、PCO和 DP

3、C）和血清（SOD、GSH-Px和MDA）中的氧化應激標志物；ELISA檢測BALF和血清中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的水平。
　　實驗結果如下：
　　（1）Ames試驗結果顯示，添加代謝活化物S9能增加CSE的致突變性。 CS-1、CS-2和CS-3香煙煙霧提取物存在顯著的基因毒性效應差異，其致突變能力大小依次為：CS-1＞CS-2＞CS-3。
　?。?）煙霧暴露56 d后，CS-1、CS-2和CS-3實

4、驗組大鼠出現(xiàn)了典型的COPD病理特征：肺組織及支氣管周圍有大量炎癥細胞聚集、浸潤，氣道重塑明顯；氣管呈現(xiàn)炎癥細胞聚集，偶有粘膜上皮細胞脫落。半定量病理分析顯示，實驗組肺泡平均內襯間隔（MLI）、支氣管壁厚度（Wat）、平滑肌層厚度（Wam）較對照組均顯著增高（P＜0.05），平均肺泡數(shù)（MAN）變化較對照組顯著性降低（P＜0.05）。
　?。?）隨著染毒時間的延長，煙熏大鼠肺組織中 SOD、GSH-Px活力及 ROS、MDA和PC

5、O水平較對照組顯著增高（P＜0.05），DPC水平變化不顯著（P＞0.05）。煙熏大鼠血清中GSH-Px活性和MDA的水平較正常組顯著性的升高（P＜0.05），而SOD活力無顯著性變化。
　?。?）與對照組比較，染毒56 d后，煙熏大鼠BALF及血清中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表達水平明顯高于對照組（P＜0.05），而MMP-9/TIMP-1均低于對照。
　　上述指標在CS-1、CS-2與CS-3實驗組間存在一