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文檔簡介
1、本論文在改進(jìn)魚類mtDNA分離純化方法的基礎(chǔ)上,利用JGB(JanusGreenB)能特異地對線粒體進(jìn)行超活染色的特性來跟蹤線粒體的提取,研究離心速度與線粒體回收率的關(guān)系。同時對常用的方法和技術(shù)進(jìn)行了探索和改進(jìn),利用暗紋東方鲀組織較少取樣,獲取純度好、得率高的mtDNA。利用分離純化的暗紋東方鲀肝臟mtDNA為模板,按照紅鰭東方鲀(Takifugurubripes)mtDNA序列設(shè)計(jì)合成特異引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,首次克隆并測定了暗紋東方鲀
2、mtDNA的Cytb、COI、COⅡ、COⅢ、D-loop基因及其側(cè)翼的tRNA基因。上述基因已在GenBank登錄。運(yùn)用DNA分析軟件,對暗紋東方鲀mtDNA測定的基因進(jìn)行序列和結(jié)構(gòu)分析,并選取GenBank中十多個目近20種魚類的相應(yīng)序列進(jìn)行比較分析,結(jié)果顯示暗紋東方鲀與這些魚類具有較高的核苷酸和氨基酸同源性。利用分子生物學(xué)相關(guān)軟件,對暗紋東方鲀與其他種類魚的相關(guān)基因序列建立進(jìn)化樹,并與傳統(tǒng)的分類地位進(jìn)行比較,結(jié)果表明與傳統(tǒng)的分類地
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