暗紋東方鲀養(yǎng)殖群體遺傳多樣性分析及生長(zhǎng)性狀微衛(wèi)星標(biāo)記篩選.pdf

1、暗紋東方鲀（Takifugu obscurus)屬鲀形目、鲀科、東方鲀屬，近海暖溫水性底層魚類,有海淡水生殖洄游習(xí)性，主要分布在中國(guó)的東海、黃海和渤海區(qū)域，是一種經(jīng)濟(jì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的水產(chǎn)品。然而近些年來，由于暗紋東方鲀?cè)鹊纳?、生態(tài)環(huán)境逐漸惡化、長(zhǎng)江水文條件逐年改變以及人為的過度捕撈等原因，導(dǎo)致了野生暗紋東方鲀資源枯竭現(xiàn)象日益嚴(yán)重，間接導(dǎo)致養(yǎng)殖產(chǎn)量銳減、經(jīng)濟(jì)效益下降。因此，暗紋東方鲀的遺傳改良、種質(zhì)保護(hù)等工作迫在眉睫。本論文研究主要采

2、用微衛(wèi)星技術(shù)對(duì)上海、廣州、江蘇三個(gè)養(yǎng)殖區(qū)域的暗紋東方鲀?nèi)后w進(jìn)行遺傳多樣性研究，并且對(duì)與生長(zhǎng)性狀相關(guān)的微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行篩選，不僅了解目前養(yǎng)殖的暗紋東方鲀種質(zhì)資源情況，而且對(duì)今后的良種培育、遺傳改良、種質(zhì)提升、產(chǎn)量增高等提供了一定的科學(xué)理論依據(jù)。
　　本文首先闡述了魚類遺傳育種的技術(shù)及其當(dāng)前的發(fā)展動(dòng)態(tài)，分析了現(xiàn)代生物技術(shù)在魚類育種中的應(yīng)用概況，探討了魚類遺傳育種的發(fā)展趨勢(shì)，旨在為魚類新品種選育提供理論依據(jù)與參考；并明確了建立先進(jìn)的魚類育

3、種技術(shù)體系和育種研究創(chuàng)新平臺(tái)、提高魚類遺傳育種的效果和苗種質(zhì)量對(duì)促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展具有重要的意義。其次，通過對(duì)有關(guān)資料的歸納研究，對(duì)暗紋東方鲀的基礎(chǔ)生物學(xué)、繁殖生物學(xué)、人工養(yǎng)殖技術(shù)、生態(tài)、毒素等領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述。通過概述能夠清楚的看到暗紋東方鲀的研究現(xiàn)狀，結(jié)合研究技術(shù)和成果，可以更好的探究今后的研究重點(diǎn)和研究方向，有利于填補(bǔ)暗紋東方鲀的研究空白和深化科研研究?jī)r(jià)值。
　　為了給養(yǎng)殖暗紋東方鲀分子輔助育種和遺傳改良提供理論

4、的基礎(chǔ)，本研究基于微衛(wèi)星標(biāo)記分析技術(shù)，采用21對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)廣州(GZ)、江蘇(JS)和上海(SH)三個(gè)養(yǎng)殖群體的暗紋東方鲀遺傳多樣性進(jìn)行研究分析，結(jié)果可以成功擴(kuò)增出具有一定多態(tài)性片段的微衛(wèi)星位點(diǎn)共有19個(gè)。19個(gè)位點(diǎn)分析共得到125個(gè)等位基因，每個(gè)位點(diǎn)等位基因數(shù)范圍從3到11，平均值是6.58，有效等位基因范圍從1.7到7.8，平均值是4.5，平均觀測(cè)雜合度范圍從0.1556到1.0000，平均期望雜合度范圍從0.3993到0.875

5、9，平均多態(tài)信息含量（PIC）范圍從0.3533到0.8577。三群體的平均多態(tài)信息含量（PIC）由小到大依次為GZ、SH、JS群體。三群體間遺傳分化指數(shù)分別為0.0481、0.0617、0.0755，平均值為0.0808，可見發(fā)生遺傳分化程度較小。GZ和JS群體間的遺傳距離最近（0.2039），GZ和SH群體間的遺傳距離最遠(yuǎn)（0.3508）。用UPGMA法進(jìn)行聚類分析，GZ群體和JS群體聚為一類，SH為一類。分析表明結(jié)果不僅基本符合三

6、個(gè)養(yǎng)殖群體的養(yǎng)殖環(huán)境，也反映出各群體的遺傳多樣性比較豐富，并具有一定程度的遺傳分化。
　　另外，本文為了篩選與暗紋東方鲀生長(zhǎng)相關(guān)的微衛(wèi)星分子標(biāo)記，采用SSR結(jié)合BSA技術(shù)對(duì)于同齡孵化群體的同池養(yǎng)殖暗紋東方鲀生長(zhǎng)性狀相關(guān)微衛(wèi)星標(biāo)記的篩選。利用85對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)暗紋東方鲀生長(zhǎng)快、慢兩個(gè)基因池進(jìn)行分析，共篩選到14對(duì)微衛(wèi)星具有差異片段。然后分析這14個(gè)差異微衛(wèi)星位點(diǎn)在兩個(gè)基因池的暗紋東方鲀個(gè)體的差異條帶，結(jié)果表明：位點(diǎn)TOP03、TOG

7、01、fms15、fms75的生長(zhǎng)慢組特有條帶的出現(xiàn)率分別達(dá)到：63.33％、53.33%、33.33%和43.33%，相關(guān)系數(shù)(r)分別為：-0.553、-0.346、-0.333和-0.423，與生長(zhǎng)性狀呈現(xiàn)極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系（p<0.01）；fms89生長(zhǎng)快組特有條帶的出現(xiàn)率為33.33%，相關(guān)系數(shù)(r)為：0.388，與生長(zhǎng)性狀呈現(xiàn)極顯著正相關(guān)關(guān)系（p<0.05)。而驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果只有位點(diǎn)fms15、fms75與生長(zhǎng)性狀顯著相關(guān)，相