miR-24在糖尿病胰島β細胞損傷中的作用和機制研究.pdf

1、糖尿病是由于胰島素絕對或相對不足引起的以慢性高血糖為主要特征的全身性代謝紊亂綜合癥。目前認為，胰島β細胞的功能障礙及數(shù)量減少是2型糖尿病的主要發(fā)病原因。伴隨著營養(yǎng)過剩以及肥胖的發(fā)生，人體血漿中游離脂肪酸的水平明顯增加。脂毒性是導致胰島β細胞衰竭的重要病理因素，但其損傷機制至今尚未完全闡明。
　　本研究發(fā)現(xiàn)miRNA-24(miR-24)在胰島β細胞中高表達，并且在肥胖相關的糖尿病小鼠（db/db和HFD小鼠）的胰島中其表達進一步上

2、調。選用飽和脂肪酸palmitate處理細胞以模擬體內高血脂狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)palmitate也可以增加人原代胰島及小鼠β細胞系MIN6細胞中miR-24的表達水平。過表達miR-24將損傷胰島β細胞的增殖能力及胰島素分泌功能。其中miR-24介導的細胞增殖抑制依賴于Cdk4和Ccnd3蛋白水平的降低。為了更好地闡明上述現(xiàn)象的機制，本研究選用了Affymetrix基因芯片技術。芯片結果顯示，過表達miR-24可以直接或間接地至少1.5倍下調3

3、51個基因的表達。運用軟件DAVID BioinformaticsResources6.7對351個表達下降的基因進行GO分析，提示miR-24與細胞周期及外源刺激誘導的胰島素分泌過程有關，這也支持上述所檢測到的由過表達miR-24介導的細胞表型。聯(lián)合生物信息學分析、熒光素酶報告基因技術以及實時定量PCR實驗，我們篩選到了多個miR-24的直接靶基因，其中包含Hnf1a、Neurod1等4個MODY基因。干擾Hnf1a或Neurod1的

4、表達可以模擬過表達miR-24介導的細胞表型;而過表達Hnf1a或Neurod1可以逆轉由過表達miR-24引起的細胞增殖抑制及GSIS功能障礙?？梢?，Hnf1a和Neurod1在過表達miR-24介導的細胞損傷過程中發(fā)揮了重要的作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，抑制miR-24的表達能夠很大程度恢復HFD小鼠胰島的GSIS功能。此外，高糖和過氧化氫同樣能促進miR-24的表達并下調其靶基因Neurod1和Hnf1a的表達。
　　綜上所述，本研