不同分化階段樹突狀細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的：樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）被認(rèn)為是目前功能最為強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在啟動(dòng)和放大固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。不同分化階段DCs運(yùn)動(dòng)能力不同，可導(dǎo)致免疫應(yīng)答結(jié)果的不同。因此，研究不同分化階段樹突狀細(xì)胞重要細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白的表達(dá)變化，為深入研究DCs運(yùn)動(dòng)能力和提高基于過繼回輸DCs的抗腫瘤免疫治療療效提供理論依據(jù)。
　　方法：外周血單個(gè)核細(xì)胞來源的單核細(xì)胞，在體外經(jīng)重組人白介素-4（rec

2、ombinant human interleukin-4,rhIL-4）和重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)誘導(dǎo)培養(yǎng)5天獲得未成熟DCs(immature dendritic cells,imDCs)，繼續(xù)經(jīng)腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、

3、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子和重組人白細(xì)胞介素-4誘導(dǎo)培養(yǎng)3天后分化為成熟樹突狀細(xì)胞(mature dendritic cells,mDCs)。分別提取不同分化階段DCs的總蛋白和總RNA，實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time qPCR)和蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白的基因和蛋白水平的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：?jiǎn)魏思?xì)胞經(jīng)imDCs向mDCs分化的過程中，一些肌動(dòng)蛋白微絲的單體隔離蛋白、加帽蛋白、橫連蛋白、解聚蛋白、成核蛋白和膜結(jié)合