辛伐他汀對高糖刺激的系膜細(xì)胞細(xì)胞骨架的變化及CTGFmRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察辛伐他汀對高糖培養(yǎng)所致的系膜細(xì)胞細(xì)胞骨架的變化及其結(jié)締組織生長因子表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步探討他汀類藥物非降脂依賴的腎保護(hù)作用及其作用機制。 方法：將體外培養(yǎng)的大鼠系膜細(xì)胞分為6組，正常組(糖濃度5.6mmol/L)，高糖組(糖濃度30mmol/L)，甘露醇對照組，高糖加不同濃度的辛伐他汀組(10umol/L，25umol/L，50umol/L)。在不同的作用時間12h，24h，48h下，采用rhodamine-phal

2、loiodin染色，熒光顯微鏡下觀察系膜細(xì)胞F-actin的形態(tài)并測定其熒光強度，RT-PCR法檢測系膜細(xì)胞CTGFmRNA的表達(dá)。 結(jié)果:1.免疫熒光檢測結(jié)果示高糖組系膜細(xì)胞F-actin的熒光強度在12h,24h,48h與對照組相比表達(dá)增強，P<0.05，且隨作用時間的延長，強度也有明顯增強，每兩兩時間點之間相比P<0.05，有明顯統(tǒng)計學(xué)差異。辛伐他汀對高糖刺激的系膜細(xì)胞細(xì)胞骨架F-actin的熒光強度有明顯的抑制作用，P<

3、0.05,且濃度越大作用時間越長抑制作用越明顯，不同的濃度組之間及不同的時間段之間兩兩相比P<0.05，有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異。2.RT-PCR結(jié)果顯示高糖可以使系膜細(xì)胞CTGFmRNA的表達(dá)明顯增強，與對照組相比P<0.05，且作用時間越長增強作用越明顯，12h，24h，48h兩兩相比P<0.05，有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異。辛伐他汀可以明顯抑制其增強作用與高糖組相比P<0.05，且作用時間越長濃度越大，抑制作用越明顯，不同濃度組及時間段兩兩相比

4、P<0.05，有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異。3.各組在相應(yīng)的時間段內(nèi)系膜細(xì)胞細(xì)胞骨架F-actin的熒光強度與CTGFmRNA的灰度值之間存在明顯的相關(guān)關(guān)系,P<0.05。 結(jié)論: 1.高糖在12h,24h,48h內(nèi)可使系膜細(xì)胞F-actin重組及CTGFmRNA的表達(dá)增強，呈時間依賴性。2.辛伐他汀對上述情況有明顯拮抗作用，且呈一定的時間和濃度依賴性。3.CTGFmRNA表達(dá)與F-actin的熒光強度存在相關(guān)性。4.CTGFmRNA表達(dá)