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文檔簡介
1、目的:本文對土槿皮乙酸體外抗人肝癌細(xì)胞(HepG2)的機(jī)制進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。
方法:細(xì)胞計數(shù)法和細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察法確定了土槿皮乙酸是否具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的能力;劃痕實驗檢測土槿皮乙酸是否具有抑制肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力;流式細(xì)胞儀檢測土槿皮乙酸對細(xì)胞周期的影響;熒光染色法檢測土槿皮乙酸處理后HepG2細(xì)胞中微管聚集情況;Real-time PCR檢測土槿皮乙酸對P53基因轉(zhuǎn)錄的影響;應(yīng)用Western blot方法檢測細(xì)胞凋亡和
2、周期相關(guān)蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:細(xì)胞計數(shù)法和細(xì)胞形態(tài)觀察法確定了土槿皮乙酸時間依賴性的抑制HepG2細(xì)胞的生長;形態(tài)學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)和相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果確定其抑制細(xì)胞生長通過細(xì)胞凋亡和G2/M周期阻滯來實現(xiàn);同時土槿皮乙酸處理能有效的抑制肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移;而熒光染色法檢測確定了土槿皮乙酸能夠促進(jìn)細(xì)胞骨架蛋白聚集來參與周期阻滯、凋亡以及抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)移;對P53基因轉(zhuǎn)錄的檢測表明土槿皮乙酸降低了P53基因轉(zhuǎn)錄,說明其在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)細(xì)胞功能;而
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