羊腎中氨基?；傅奶崛〖皯?yīng)用.pdf

1、在傳統(tǒng)的20種天然氨基酸中，對(duì)于L型和D型都有利用價(jià)值的氨基酸，化學(xué)合成結(jié)合手性拆分的方法，具有低成本、適于大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。而高效、綠色、安全的氨基?；阜ú鸱郑遣鸱职被岬淖罴逊椒ㄖ?。氨基?；笍V泛地存在于動(dòng)物、植物、微生物中，它能夠水解N-?；?L或D-氨基酸的酰胺鍵，生成L或D-氨基酸，目前主要應(yīng)用于工業(yè)化L-或D-氨基酸的生產(chǎn)。本文采用硫酸銨鹽析，丙酮分級(jí)沉淀的方法，從新鮮羊腎中提取氨基酰化酶。拆分在堿性條件下用乙酸酐作為

2、乙?；噭┖铣傻腘-乙酰-L-蘇氨酸。并且以殼聚糖為載體，戊二醛為交聯(lián)劑，固定氨基?；福瑢?duì)氨基?；傅墓潭ɑ瘲l件、固定化酶的性質(zhì)進(jìn)行了研究。為氨基酸生產(chǎn)，尤其是蘇氨酸的酶法生產(chǎn)提供理論依據(jù)。 試驗(yàn)結(jié)果表明：通過(guò)飽和度為0.45的硫酸銨鹽析，丙酮分級(jí)沉淀(收集40-60﹪(v/v)的部分)，該酶的比活為226U/mg，純化倍數(shù)為18.8，回收率為52﹪，Km值為4.228×10<'-2>mol/L，最適pH為7.5-8.0，最適

3、反應(yīng)溫度隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。N-乙酰-L-蘇氨酸合成較適宜的合成工藝條件為：蘇氨酸與乙酸酐最佳的摩爾比為1∶1.0～1∶1.05，反應(yīng)的pH值為7～9，反應(yīng)溫度為10-20℃，反應(yīng)最佳時(shí)間通常為產(chǎn)生渾濁后一個(gè)小時(shí)之內(nèi)。游離氨基?；覆鸱痔K氨酸的優(yōu)化條件：反應(yīng)溫度為37℃，pH為7.0，初始底物濃度為0.2mol/L，L-蘇氨酸收率為70.9﹪。拆分蛋氨酸的優(yōu)化條件：反應(yīng)溫度為37℃，pH為7.5，初始底物濃度為0.3mol/L，L

4、-蘇氨酸收率為74.3﹪。 在pH值為6.0，溫度30℃的條件下，0.1g殼聚糖微球與5ml1﹪戊二醛的交聯(lián)后，固定0.8mg氨基?；感Ч罴选９潭ɑ傅淖钸m溫度和pH分別為50℃和7.0，而游離酶的最適溫度為40℃，最適pH為7.5，固定化酶在50-70℃范圍內(nèi)都保持了較高的酶活力，熱穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于游離酶，固定化酶的K<,M>值為11.796×10<'-2>mol/L，較游離酶有所升高，該固定化酶具有良好的操作及保存穩(wěn)定性。