羊肚菌的多糖提取

1、1材料與方法11供試菌種羊肚菌(Mchellaesculenta)，本實驗室保存。12培養(yǎng)基121斜面種子培養(yǎng)基：馬鈴薯200％，蔗糖20％，瓊脂20％，水1000mL，pH值自然。222PDA加富培養(yǎng)基：馬鈴薯200％，蔗糖20％，KH2P04015％，MgS047H20O15％，瓊脂2O％，水1000mL，pH值自然。123液體種子培養(yǎng)基：蔗糖2％、蛋白胨01％、酵母膏O5％、KH2P04005％、MgS04.7H20005％，pH

2、值自然。241羊肚菌的液體培養(yǎng)將羊肚菌(Mesculenta)菌種經(jīng)斜面PDA培養(yǎng)基活化培養(yǎng)后，接種到裝有PDA加富培養(yǎng)基的平皿中，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直至長滿。用無菌打孔器在長滿菌絲體的平皿培養(yǎng)基上取一塊約0.5—1.0cm2的菌種塊接入盛有100mL液體種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，25℃、150r／min振蕩培養(yǎng)72h，243菌絲體生物量的測定發(fā)酵液經(jīng)真空泵抽濾得到的沉淀物即為菌絲體，將菌絲體用蒸餾水反復洗滌后用四層紗布

3、過濾，60C2451多糖(硒多糖)的初步分離Sevag法脫蛋白Sevag法是利用蛋白質(zhì)遇有機溶劑變性后不溶于水的特點而將其分離出去。Sevag法是經(jīng)典的脫蛋白方法，條件較溫和，但需反復5次左右才能除去大多數(shù)的蛋白質(zhì)。粗多糖制品用60℃熱水溶解，定容至一定體積加入l／2體積的氯仿.正丁醇(體積比為2：1)混合液，振搖40min，靜置分液，重復多次，至水相與有機相之間無白色沉淀時，離心，提取上層水相，濃縮，真空冷凍干燥，得脫蛋白粗多糖。H2