MVN區(qū)Glu離子型受體參與血清NE含量的調(diào)節(jié).pdf

1、實(shí)驗?zāi)康?
　　1998年就有學(xué)者提出，前庭交感反射的中樞通路。它們是前庭神經(jīng)-前庭神經(jīng)核(nuclei vestibularis，VN)-延髓外側(cè)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)-延髓頭端腹外側(cè)區(qū)-脊髓灰質(zhì)側(cè)角-交感神經(jīng)。本研究室用免疫組織化學(xué)法又發(fā)現(xiàn)，前庭內(nèi)側(cè)核(medial vestibular nucleus，MVN)區(qū)的N-甲基-D-門冬氨酸受體(N-methyl-D-aspartic acid receptor，NMDA)和α-氨基-3-羥基

2、-5-甲基-4-異惡唑丙酸受體(amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor,AMPA)參與由急性低血壓誘發(fā)的前庭性血壓調(diào)控過程，也能增加血清腎上腺素的濃度明顯增加。機(jī)體血液中腎上腺素的來源主要是腎上腺髓質(zhì)，而去甲腎上腺素則由腎上腺髓質(zhì)和交感神經(jīng)節(jié)后神經(jīng)元的末梢分泌。血液中的去甲腎上腺素可以反應(yīng)交感神經(jīng)的興奮狀態(tài)。至于急性低血壓經(jīng)外周前庭器官影響血壓的調(diào)控中是否

3、有交感神經(jīng)參與，未見相關(guān)研究報道。
　　本研究的目的在于探討急性低血壓誘發(fā)前庭性血壓調(diào)控過程中，MVN區(qū)谷氨酸的部分離子型受體對血清去甲腎上腺素含量的影響。同時采用蛋白印跡分析法進(jìn)一步證實(shí)硝普鈉誘發(fā)急性低血壓時，MVN區(qū)給予谷氨酸的離子型受體激動劑和阻斷劑對脊髓胸段內(nèi)c-Fos和p-ERK1/2蛋白表達(dá)的影響。以證明急性低血壓時MVN區(qū)的谷氨酸離子型受體經(jīng)過脊髓-交感神經(jīng)參與由急性低血壓誘發(fā)的前庭性血壓調(diào)控機(jī)制。
　　實(shí)驗方

4、法:
　　實(shí)驗為了排除血壓的變化經(jīng)過壓力感受器對中樞神經(jīng)核團(tuán)功能的影響，用手術(shù)方法摘除動物的頸動脈竇和主動脈弓壓力感受器。用多通道生理記錄儀監(jiān)測該模型大鼠壓力感受性反射的敏感性，確定模型制備成功48h后，再進(jìn)行MVN區(qū)核團(tuán)定位，將36只SD大鼠隨機(jī)分為阻斷劑組(Antagonist)和激動劑組(Agonist)。阻斷劑組中分為MVN區(qū)注射人工腦脊液(ACSF)的對照組以及阻斷劑MK-801、CNQX，核團(tuán)給藥10min后靜脈注射硝

5、普鈉（Sodium nitroprusside，SNP）誘發(fā)低血壓。激動劑組又分為注射人工腦脊液(ACSF)的對照組以及受體激動劑NMDA組和AMPA組3個小組。激動劑組不誘發(fā)急性低血壓。用微量泵以1.5μl/min的速度向核團(tuán)注射藥品。30min后開胸心室腔內(nèi)取血離心獲得血清后，用ELASA法檢測血清去甲腎上腺素的含量。取T5-7段脊髓，用蛋白印跡分析法(Western-Blot)對該段脊髓內(nèi)c-Fos和p-ERK1/2蛋白表達(dá)進(jìn)行檢

6、測。
　　實(shí)驗結(jié)果:
　　1.將谷氨酸(Glu)離子型受體阻斷劑(CNQX、MK-801)經(jīng)過定位針注射到前庭內(nèi)側(cè)核（MVN）區(qū)后，再用硝普鈉(SNP)誘發(fā)急性低血壓，發(fā)現(xiàn)胸髓T5-7段中的c-Fos蛋白的表達(dá)以及p-ERK1/2蛋白含量明顯低于對照組(ACSF)(P＜0.05)。
　　2.前庭內(nèi)側(cè)核區(qū)注射谷氨酸(Glu)離子型受體激動劑(NMDA、AMPA)，使胸髓T5-7段中的c-Fos和p-ERK1/2蛋白的表達(dá)

7、含量明顯高于注射人工腦脊液的對照組(P＜0.05)。
　　3.把谷氨酸(Glu)的兩種離子型受體阻斷劑(CNQX、MK-801)注射到前庭內(nèi)側(cè)核(MVN)區(qū)后，再用硝普鈉(SNP)誘發(fā)急性低血壓，發(fā)現(xiàn)血清中去甲腎上腺素(NE）的含量明顯低于對照組(ACSF)(P＜0.05)。
　　4.前庭內(nèi)側(cè)核區(qū)的谷氨酸(Glu)離子型受體激動劑(NMDA、AMPA)，明顯提高血清中去甲腎上腺素(NE)的含量，與對照組(ACSF)比較差異顯