2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)介導(dǎo)的低密度脂蛋白受體(low density lipoprotein receptor,LDLr)表達(dá)失調(diào)在糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)早期足細(xì)胞損傷中的作用。
  方法:選取8周齡雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,按照簡單隨機(jī)抽樣原則分為對照組(Control)、糖尿病組(diabetic mellitus,

2、DM)、糖尿病+阿司匹林組(DM+Aspirin),每組均為10只。采用鏈尿佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型,造模成功后Control組大鼠和DM組大鼠給予羧甲基纖維素鈉灌胃,DM+Aspirin組大鼠給予Aspirin灌胃,直至第12周。于第12周收集24小時尿液、檢測尿ACR(microalbumin to creatinine ratio,ACR),第12周末處死大鼠,收集血標(biāo)本,檢測血脂譜,留取腎

3、組織。通過油紅O染色及胞內(nèi)游離膽固醇定量測定法觀察腎小球脂質(zhì)沉積情況。通過透射電鏡觀察足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變,通過免疫組化染色及Western Blot觀察足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白WT-1及nephrin在腎臟的表達(dá)情況。通過免疫組化染色及Western Blot觀察COX-2、LDLr、膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-2(sterol regulatory element-binding protein-2,SREBP-2)及其裂解激活蛋白(SRE

4、BP cleavage-activating protein,SCAP)在腎臟的表達(dá)情況,并分析COX-2與LDLr表達(dá)的相關(guān)性。通過Western Blot觀察腎臟促炎因子表達(dá)情況,并通過免疫熒光共染色觀察COX-2與WT-1在腎臟的共表達(dá)情況。
  結(jié)果:與Control組大鼠相比,DM組大鼠血脂譜及尿ACR顯著升高(P<0.01);PAS染色(Periodic Acid-Schiff staining,PAS)可見腎小球肥大

5、、系膜基質(zhì)增多;免疫組化及Western Blot示腎臟WT-1、nephrin蛋白表達(dá)下降(P<0.01),透射電鏡觀察到足細(xì)胞足突融合消失,腎小球基底膜增厚,提示DM組大鼠足細(xì)胞損傷加重;油紅O染色可見腎小球內(nèi)有顯著的脂質(zhì)沉積,免疫組化染色示腎小球COX-2及LDLr、SCAP、SREBP-2蛋白的表達(dá)增加(P<0.01);相關(guān)性分析顯示,COX-2蛋白表達(dá)與LDLr蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.85,P<0.01)。Western

6、 Blot示DM組大鼠促炎因子表達(dá)明顯增加;激光共聚焦熒光顯微鏡觀察進(jìn)一步證實,大鼠腎小球COX-2與足細(xì)胞特異性標(biāo)志物WT-1存在共表達(dá)。而在DM+Aspirin組大鼠,上述病理改變明顯減輕(P<0.05)。
  結(jié)論:COX-2表達(dá)上調(diào)加重了DN早期腎小球足細(xì)胞損傷,其機(jī)制可能與高糖條件下促炎因子表達(dá)增加,從而破壞LDLr負(fù)反饋調(diào)節(jié)通路,上調(diào)足細(xì)胞LDLr表達(dá),增加足細(xì)胞內(nèi)膽固醇攝入,致使足細(xì)胞脂質(zhì)過度沉積有關(guān);而抑制COX-

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