深海真菌Acaromyces ingoldii篩選及其次級代謝產(chǎn)物活性研究.pdf

1、海洋擁有特殊的環(huán)境，像高鹽、弱堿性、低營養(yǎng)、缺氧等，棲息于海洋環(huán)境的海洋微生物為了適應(yīng)這些特殊環(huán)境，產(chǎn)生了獨特的代謝途徑，因此可以產(chǎn)生具有特殊生物活性及骨架的次級代謝產(chǎn)物。本論文通過篩選獲得一株來源于南海深海沉積物的活性深海菌株Acaromyces ingoldiiFS121，其發(fā)酵粗提物濃度在100?g/mL時對肝癌細胞（HepG-2）、神經(jīng)癌細胞（SF-268）、乳腺癌細胞（MCF-7）和肺癌細胞（NCI-H460）有明顯的抑制作用

2、，生長抑制率分別為92.2％，95.7%，95.1%和92.3%。因此對該菌株進行了大規(guī)模發(fā)酵、代謝產(chǎn)物提取分離。
　　本論文中實驗采用正、反相硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、高效液相柱色譜、制備薄層色譜等各種分離方法，從深海真菌Acaromyces ingoldiiFS121的液體和固體發(fā)酵提取物中共分離得到18個化合物，采用各種波譜技術(shù)（ESI-MS、HR-ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEP

3、T、HMQC、HMBC、1H-1H COSY、NOESY等），結(jié)合理化性質(zhì)，分別闡明了18個化合物的結(jié)構(gòu)（圖1），包括2個萘醌并二氫吡喃類化合物；4個甾類化合物，其中1個甾酮、3個甾醇；1個異香豆素類化合物；1個嘧啶堿類化合物；1個噻唑類化合物；1個噻唑乙酯類化合物；8個苯環(huán)衍生物。其中，化合物AF-10和AF-12為新化合物，并且通過與已知化合物文獻中1H-NMR偶合常數(shù)以及CD數(shù)據(jù)的對比確定了化合物AF-10的絕對構(gòu)型。本實驗中18

4、個化合物均為首次從Acaromyces屬真菌中分離得到。
　　采用SRB法以肝癌細胞（HepG-2）、神經(jīng)癌細胞（SF-268）、乳腺癌細胞（MCF-7）和肺癌細胞（NCI-H460）為供試細胞株，測定了分離到的單體化合物的體外細胞毒活性；采用濾紙片法以柱枝雙胞霉、鏈格孢、新月彎孢霉、膠孢炭疽菌、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大腸桿菌（Escherichia coli）、枯草芽孢桿菌(Bacillu

5、s subtilis)為供試菌株，測定了分離到的單體化合物的體外抗菌活性，對于細胞毒活性顯著化合物進一步測定了IC50值。結(jié)果表明AF-6，AF-8，AF-9，AF-10和AF-11對腫瘤細胞SF-268、MCF-7、NCI-H460、HepG-2的增殖具有明顯的抑制活性，其中AF-10對以上4種腫瘤細胞株的IC50值分別為7.88、6.73、10.03、7.34?M，AF-11以上4種腫瘤細胞株的IC50值分別為5.72、4.10、6