三株海洋來(lái)源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物及其活性的研究.pdf

1、海洋來(lái)源真菌由于其獨(dú)特的生存環(huán)境，在長(zhǎng)期的自然選擇過(guò)程中形成了獨(dú)特而豐富多樣的生物合成途徑，因而其次級(jí)代謝產(chǎn)物具有結(jié)構(gòu)的新穎性和生物學(xué)活性的多樣性，是尋找藥物先導(dǎo)化合物的重要資源。本研究從13個(gè)南海來(lái)源海綿樣品中共分離純化出61株真菌。通過(guò)抗腫瘤活性的篩選，共篩選出16株真菌。通過(guò)抗結(jié)核活性篩選，共篩選出1株活性真菌，結(jié)合TLC、HPLC對(duì)這17株活性菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行化學(xué)篩選，選取了其中的2株目標(biāo)真菌 MXH-99（Metarhi

2、zium anisopliae）和KXL-157（Apiospora montaqnei）作為下一步研究的對(duì)象。此外，本論文還對(duì)實(shí)驗(yàn)室前期分離得到的一株紅樹(shù)林來(lái)源真菌GWQ-143（Penicillium solitum）的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究。
　　利用硅膠柱層析、凝膠柱層析和半制備HPLC等方法對(duì)3株真菌發(fā)酵產(chǎn)物的乙酸乙酯相進(jìn)行分離提取，從三株目標(biāo)真菌 MXH-99、KXL-157和 GWQ-143的發(fā)酵產(chǎn)物乙酸乙酯的提取物

3、中共分離得到28個(gè)單體化合物。通過(guò)理化性質(zhì)及波譜技術(shù)并結(jié)合文獻(xiàn)，對(duì)這28個(gè)單體化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，其中新化合物9個(gè)，新天然產(chǎn)物2個(gè)。新化合物包括2個(gè)萘并-γ-吡喃酮糖苷（1-2）、1個(gè)己烯酮類化合物（9）、2個(gè)內(nèi)酯類（15-16）、2個(gè)苯甲酰胺類（17-18）和2個(gè)混源萜類（21-22），新天然產(chǎn)物為苯甲酰胺類（19-20），此外得到的化合物結(jié)構(gòu)類型還包括二苯醚類、Xanthone類、二酮哌嗪類、四氫萘酮類和灰黃霉素及其類似物。

4、>　　采用紙片法，利用草分枝桿菌（Mycobacterium phlei.）藥理模型對(duì)化合物1-8的抗結(jié)核活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)化合物6和7對(duì)草分枝桿菌具有弱的抑制活性，IC50值均為50μg/mL；采用MTT和SRB法，利用小鼠白血病細(xì)胞（P388）藥理模型對(duì)單體化合物15-28進(jìn)行了初步體外抗腫瘤活性評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，混源萜類化合物23-25對(duì)P388細(xì)胞具有弱的細(xì)胞增殖抑制活性，其中，化合物24在50μM濃度下，對(duì)P388細(xì)胞的抑制率

5、為73.8％；化合物23和25在25μM濃度下，對(duì)P388的抑制率分別為43.8%、36.6%。
　　本文通過(guò)對(duì)真菌MXH-99的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究，分離鑒定出8個(gè)化合物，其中化合物1-2為新化合物；化合物6-7具有較好的抗草分枝桿菌活性，為抗結(jié)核藥物的研制提供了活性化合物。通過(guò)對(duì)真菌KXL-157的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離鑒定，目前共鑒定出6個(gè)化合物，其中化合物9為新化合物，該菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物中，灰黃霉素含量較高，為抗真菌藥物的