黑色素瘤黏附分子促進(jìn)斑馬魚(yú)神經(jīng)修復(fù)的炎癥與血管機(jī)制研究.pdf

1、黑色素瘤黏附分子（MCAM）是屬于免疫球蛋白超家族中的一個(gè)多功能分子，在某些腫瘤血管再生、炎癥反應(yīng)、胚胎的發(fā)育中起重要作用。此外MCAM在斑馬魚(yú)、雞、小鼠、大鼠、人基因組中有著較高的保守性。近年來(lái)對(duì)于MCAM的研究較多，其中較多的研究側(cè)重于此分子在腫瘤血管再生及一些炎癥反應(yīng)中的作用，然而MCAM在神經(jīng)外傷修復(fù)中的作用機(jī)制研究尚少，在此我們基于前人的研究進(jìn)一步拓展了MCAM在斑馬魚(yú)脊髓損傷修復(fù)過(guò)程中的作用。
　　本實(shí)驗(yàn)中，我們利用成

2、年斑馬魚(yú)脊髓損傷模型研究了MCAM在損傷后脊髓神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)情況及其在血管再生和炎癥反應(yīng)中的作用。通過(guò)原位雜交與免疫熒光共標(biāo)實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)MCAM分子可以表達(dá)在運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元（Islet-1）及未成熟的神經(jīng)元(HuC/D)中，且隨著MCAM表達(dá)水平的升高，運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的數(shù)量也發(fā)生增加。利用綠色熒光蛋白標(biāo)記的血管轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)進(jìn)行脊髓損傷手術(shù)，發(fā)現(xiàn)損傷后的11d脊髓血管有明顯的再生，而且MCAM可以表達(dá)在熒光血管中。為了進(jìn)一步闡述MCAM在斑馬

3、魚(yú)脊髓損傷后血管再生中的作用，我們用MCAM Morpholino（MCAM MO）抑制斑馬魚(yú)脊髓中MCAM蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)血管再生相關(guān)因子VEGFR-2、p-p38、p-AKT的下調(diào)。此外我們利用morpholino抑制方法也證明了在斑馬魚(yú)脊髓損傷后相關(guān)炎癥因子TNF-α,IL-1β和IL-8及干細(xì)胞增殖相關(guān)因子gata3的下調(diào)。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)前人的研究（MCAM mRNA在斑馬魚(yú)脊髓損傷后的6d,11d表達(dá)有所升高，抑制MCAM蛋白表達(dá)