白藜蘆醇對(duì)家兔心功能的影響與對(duì)動(dòng)脈血管作用機(jī)制的探討.pdf

1、目的：從整體及離體兩方面來探討白藜蘆醇(resveratrol，Res)對(duì)心血管的保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)第一部分從整體水平來觀察Res對(duì)正常家兔心功能及血壓的影響；第二部分從離體水平來觀察Res對(duì)家兔離體心房肌、乳頭肌及動(dòng)脈血管的作用及其機(jī)制探討。 方法： 第一部分白藜蘆醇對(duì)正常家兔心功能及血壓的影響 家兔耳緣靜脈25％烏拉坦4ml/kg麻醉，固定于兔家臺(tái)上，右側(cè)頸總動(dòng)脈插管經(jīng)主動(dòng)脈瓣進(jìn)入左心室且股動(dòng)脈插管，通過建立空

2、白對(duì)照組(nomal control，NC)，二甲基亞砜(DMSO)溶劑對(duì)照組，大小劑量Res組，并測定心率(heanrate，HR)、左心室內(nèi)壓峰值(left ventricular systolic pressure，LVSP)、左心室舒張壓(1eR ventricular diastolic pressure，LVDP)、左心室舒張末期壓(1eR ventricular end-diastolicpressure，LVEDP)、左

3、心室內(nèi)壓上升速率最大值(1v+dp/dt<,max>)、左心室內(nèi)壓下降速率最大值(1V-dp/dt<,max>)、心室內(nèi)壓變化時(shí)間(t-dp/dt)及收縮壓(systolic blood pressure，SBP)；觀察Res對(duì)正常家兔心功能及血壓的影響。 第二部分白藜蘆醇對(duì)家兔離體心房肌、乳頭肌及動(dòng)脈血管的作用及其機(jī)制探討 1 離體腎動(dòng)脈環(huán)的制備 擊昏家兔迅速取出腎動(dòng)脈及頸總動(dòng)脈，制成有內(nèi)皮和去內(nèi)

4、皮血管模型，置于含K-R液20ml的浴槽中，浴液溫度保持37℃，持續(xù)通以95％O<,2>+5％CO<,2>的混合氣體，平衡1.5h，靜息張力1.2g，每15min更換K.R液一次。然后進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。(1)將家兔動(dòng)脈環(huán)隨機(jī)分成內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組，每組分別用30mmol/L KCl誘導(dǎo)動(dòng)脈環(huán)收縮后，以5min間隔累積加入Res使累積濃度依次為l×10<'-6>、3×10<'-6>、1×l O<'-5>、3×10<'-5>、1×10<'-4

5、>、3×10<'-4>、1×10<'-3>mol/L，記錄張力反應(yīng)；(2)將內(nèi)皮完整和去內(nèi)皮家兔動(dòng)脈環(huán)分別置于含不同阻斷劑的K.R液中進(jìn)行孵育，用30mmol/L KCl誘導(dǎo)動(dòng)脈環(huán)收縮后，累積加入Res，維持上述終濃度，觀察不同阻斷劑對(duì)Res舒張血管效應(yīng)的影響。 2 離體右心房肌(含竇房結(jié))標(biāo)本制備 家兔處死后，迅速開胸，剪斷與心臟相連大血管，取出心臟置于充氧的冷Krebs溶液中，沿房室溝剪去心室，小心剪下左右相連心

6、房(含竇房結(jié))，制備竇房結(jié)與左右心房相連標(biāo)本，注意勿損傷竇房結(jié)。在右心耳兩端尖部各系一絲線，一端固定于麥?zhǔn)显〔鄣撞?，另一端連接張力換能器；施靜息張力1g，并通過MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析系統(tǒng)記錄心率和心肌收縮力。麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)盛有20ml的心ebs溶液，連續(xù)通以95％O<,2>+5％CO<,2>混合氣體，維持溫度34.5～35.5℃，平衡1h后開始實(shí)驗(yàn)。 3 離體乳頭肌標(biāo)本制備 家兔處死后，迅速開胸，剪斷與心

7、臟相連大血管，取出心臟置于充氧的冷Krebs溶液中，用眼科剪沿心室緣將右心室剪開，充分暴露心室腔，選一完整乳頭肌，在其腱索上端用絲線結(jié)扎，沿基底部向心室肌方向切開少許并結(jié)扎，在兩結(jié)扎線的外側(cè)剪斷。標(biāo)本一端固定于帶有刺激電極的支架上，迅速放入盛有20ml的Krebs溶液的浴槽內(nèi)；標(biāo)本另一端連接張力換能器施靜息張力1g。浴槽內(nèi)連續(xù)通以95％O<,2>+5％CO<,2>混合氣，維持溫度34.5～35.5℃。平衡lh后，電刺激(波寬4ms，頻率

8、1Hz，120％閾電壓)驅(qū)動(dòng)乳頭肌收縮，通過MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析系統(tǒng)觀察和記錄收縮力變化。 結(jié)果： 第一部分白藜蘆醇對(duì)正常家兔心功能及血壓的影響 與NC對(duì)照組相比，DMSO溶劑對(duì)照組無顯著性差異；與NC對(duì)照組相比，Res在一定時(shí)間內(nèi)能明顯降低HR、LVSP、1v+dp/dt<,max>、lv-dp/dt<,max>、SBP，且呈現(xiàn)劑量依賴性；對(duì)LVDP、LVEDP、t.dp/dt<,max>的

9、影響無顯著性差異。 第二部分白藜蘆醇對(duì)家兔離體心房肌、乳頭肌及動(dòng)脈血管的作用及其機(jī)制探討 Res在10<'-6>～10,<'-3>mol/L范圍內(nèi)對(duì)腎動(dòng)脈具有劑量依賴性的舒血管效應(yīng)，但對(duì)頸總動(dòng)脈離體血管環(huán)無明顯的舒張反應(yīng)；Res在100mol/L的濃度時(shí)，舒張腎動(dòng)脈效應(yīng)在去內(nèi)皮后與內(nèi)皮完整組相比，可降低(18.2±2.3)％，有顯著性差異；在內(nèi)皮完整左旋硝基精氨酸(N.G-nitro-L-arginine methyle

10、ster，L-NAME)+Res組、格列苯脲(glibenclamide，Gli)+Res組及甲烯藍(lán)(methylenum coeruleum，MB)+Res組中分別降低(14.7±2.7)％、(10.5±3.1)％和(11±1.9)％，與對(duì)照組相比三組均存在顯著差異;在內(nèi)皮完整四乙胺 (tetraethVl鋤monium，TEA)+Res組、4-氨基吡啶(4-aminopyridine，4-AP)+Res組、氯化鋇(barium ch

11、loride，BaCl2)+Res組、阿托品(atropine，Atr)+Res組、普萘洛爾(propranolol，Pro)+Res組、吲哚美辛(indometacin，Indo)+Res組和酚妥拉明(phemolamine，Phe)+Res組中，血管舒張的受抑制程度與對(duì)照組差別無顯著性差異。在去內(nèi)皮G1i+Res組舒張腎動(dòng)脈效應(yīng)與對(duì)照組相比，可降低(4.8±1.2)％，其他組血管舒張的受抑制程度與對(duì)照組差別無顯著性差異。Res對(duì)心房

12、肌有劑量依賴性的負(fù)性頻率作用，且G1i+Res組Res的負(fù)性頻率效應(yīng)較Res對(duì)照組減弱(5.03±2.18)％，有顯著性差異；4-AP+Res組、BaC12+Res組、TEA+Res組及Atr+Res組較Res對(duì)照組無顯著性差異。Res對(duì)心室乳頭肌無明顯的負(fù)性肌力作用。 結(jié)論： 第一部分白藜蘆醇對(duì)正常家兔心功能及血壓的影響 Res可減慢HR，降低心肌收縮力及血壓，其可能與變力因素或/和負(fù)荷改變有關(guān)。 第

13、二部分白藜蘆醇對(duì)家兔離體心房肌、乳頭肌及動(dòng)脈血管的作用及其機(jī)制探討 Res具有內(nèi)皮依賴性和非內(nèi)皮依賴性的舒張腎動(dòng)脈效應(yīng)，前者的作用機(jī)制可能與一氧化氮(nitric oxide，NO)系統(tǒng)和ATP敏感性K<'+>通道(ATP-sensitive potassium channel，KATP)有關(guān)；后者則可能部分與K<,ATP>通道有關(guān)；但Res對(duì)頸總動(dòng)脈血管環(huán)無明顯的舒張反應(yīng)。Res對(duì)心房肌有負(fù)性頻率作用，其作用機(jī)制可能與該藥開放