石蒜凝集素的純化、性質(zhì)及構(gòu)象研究;單子葉石蒜科植物朱頂紅和風(fēng)雨花甘露糖結(jié)合凝集素基因的克隆及序列分析.pdf

1、該文對石蒜凝集素的研究主要包括純化、性質(zhì)、活性以及結(jié)構(gòu)幾個方面.石蒜(Lycoris radiata)球莖經(jīng)勻漿、浸取、硫酸銨分級沉淀得到粗品,將粗品過陽離子交換柱(CM-Sepharose)、陰離子交換柱(DEAE-Sepharose)和SephacrylS-100分子篩層析得到凝集素純品.經(jīng)SDS-PAGE檢測為單一蛋白帶,亞基分子量為12KD,SephacrylS-100凝膠過濾測得其表觀分子量為45KD,表明LRA是由四個相同亞

2、基組成的蛋白.LRA能凝集兔血細(xì)胞和大腸桿菌,其凝集兔血細(xì)胞和大腸桿菌細(xì)胞的效價分別為0.95ug/mL和1.9ug/mL,對外周血淋巴細(xì)胞具有很強(qiáng)的促有絲分裂能力;糖抑制實驗結(jié)果表明,甘露聚糖和甲狀腺球蛋白能抑制LRA的凝血活性;對酵母細(xì)胞的凝集實驗表明,LRA能凝集啤酒酵母細(xì)胞;在抗病毒活性方面,LRA能有效地降低II型人類單純皰疹病毒(HSV-II)對Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎細(xì)胞)的感染,在500ug/mL時對正常Vero細(xì)胞無細(xì)

3、胞毒性,IC<,50>=5~10ug/mL之間.在抗愛滋病病毒實驗中,LRA能有效降低HIV-1和HIV-2對HT-4和CEM細(xì)胞的感染,LRA對HIV-1的半抑制濃度EC<,50>分別為0.43ug/mL和0.79ug/mL,對HIV-2的EC<,50>分別為0.60ug/mL和0.59ug/mL,而LRA對HT-4和CEM的半數(shù)細(xì)胞毒性濃度為71ug/mL,表明LRA是一種有效的抗病毒蛋白.研究了不同溫度、pH和特異化學(xué)修飾后LRA