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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分:上皮性卵巢癌患者外周血及腹水淋巴細(xì)胞中PD-1表達(dá)情況的研究
目的:程序性死亡受體1(PD-1),是腫瘤微環(huán)境中重要的免疫抑制調(diào)控分子,在腫瘤免疫逃逸中起到重要作用。腫瘤微環(huán)境中除了腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TILs)外,一些學(xué)者認(rèn)為腫瘤相關(guān)淋巴細(xì)胞(TALs),如腹水淋巴細(xì)胞(ascites lymphocytes, AL)、外周血淋巴細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)
2、在腫瘤免疫逃逸中也應(yīng)具有重要作用,并逐漸成為學(xué)者的研究熱點(diǎn)。本研究擬探討上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者和良性卵巢腫瘤患者AL以及PBMC中PD-1的表達(dá)差異,并分析卵巢癌患者AL以及PBMC中PD-1與不同臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果為探討 PD-1的表達(dá)是否能作為 EOC診斷和預(yù)后的腫瘤分子標(biāo)記物提供重要的臨床數(shù)據(jù)。
方法:
1.收集50例上皮性卵巢癌患者和20例良性
3、卵巢腫瘤患者的腹水及外周血標(biāo)本。采用密度梯度離心法分離提取AL及PBMC。應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)法測(cè)定AL和PBMC中PD-1的表達(dá)情況,并應(yīng)用cell Quest Pro軟件進(jìn)行圖像顯示與分析。
2.分析評(píng)價(jià)上皮性卵巢癌及良性卵巢腫瘤患者AL與PBMC中PD-1的表達(dá)情況,并對(duì)其在不同臨床病理參數(shù)之間的差異進(jìn)行分析,應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件,以P<0.05作為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。
結(jié)果:
1.上皮性卵巢癌患者AL
4、中PD-1+、CD8+PD-1+、CD4+PD-1+的表達(dá)明顯高于良性卵巢腫瘤患者(P=0.000)。但上皮性卵巢癌與良性卵巢腫瘤患者相比PBMC中PD-1+、CD8+PD-1+、CD4+PD-1+的表達(dá)情況卻未見(jiàn)明顯差異(P>0.05)。
2.上皮性卵巢癌患者AL中PD-1的表達(dá)明顯高于PBMC中PD-1的表達(dá)(P=0.000)。且早期(Ⅰ-Ⅱ期)患者(FIGO分期)AL中PD-1的表達(dá)水平明顯低于與晚期(Ⅲ-Ⅳ期)患者(P
5、=0.004),其余臨床病理參數(shù)(年齡、分化程度、病理類型、血清CA125水平)之間PD-1的表達(dá)水平未見(jiàn)明顯差異(P>0.05)。
3.血清CA125≤800 U/ml的上皮性卵巢癌患者,其PBMC中PD-1的表達(dá)水平高于血清 CA125>800 U/ml的患者(P=0.048),其余臨床病理參數(shù)(年齡、分化程度、病理類型、FIGO分期)之間的PD-1表達(dá)水平未見(jiàn)明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
4.根據(jù)上皮性卵
6、巢癌患者1年隨訪結(jié)果,1年內(nèi)死亡和生存的患者AL和PBMC中PD-1的表達(dá)結(jié)果均未見(jiàn)明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。1年內(nèi)疾病復(fù)發(fā)和疾病無(wú)進(jìn)展的患者AL和PBMC中PD-1的表達(dá)水平也未觀察到明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
第二部分:上皮性卵巢癌患者癌組織中PD-L1和PD-L2表達(dá)情況的研究
目的:PD-L1和 PD-L2為程序性死亡受體1(PD-1)的兩個(gè)配體, PD-1與其配體結(jié)合后參與抑制性免疫調(diào)控,抑制
7、T細(xì)胞特異性殺傷能力,使腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸導(dǎo)致疾病進(jìn)展,從而介導(dǎo)腫瘤的免疫逃逸。本研究擬探討上皮性卵巢癌組織與正常或良性卵巢組織PD-L1和PD-L2中的表達(dá)差異,并分析卵巢癌組織中PD-L1和PD-L2的表達(dá)情況與其不同臨床病理特征之間的關(guān)系,目的在于明確上皮性卵巢癌中 PD-L1和 PD-L2表達(dá)的臨床意義,為臨床診斷及個(gè)體化腫瘤免疫治療提供新思路。
方法:
1.選取82例經(jīng)病理學(xué)證實(shí)為上皮性卵巢癌的癌組織及1
8、5例良性或正常的卵巢組織,采用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行染色,并由兩位病理科專業(yè)醫(yī)師進(jìn)行閱片,最終確定卵巢組織中PD-L1和PD-L2的表達(dá)情況,采用二次計(jì)分法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
2.分析評(píng)價(jià)上皮性卵巢癌及良性或正常卵巢組織中 PD-L1和 PD-L2的表達(dá)特征,并分別對(duì)PD-L1和PD-L2在不同臨床病理參數(shù)之間的差異進(jìn)行分析,應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件,以P<0.05作為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。
結(jié)果:
1.上皮性卵
9、巢癌組織中PD-L1和PD-L2的表達(dá)水平明顯高于良性或正常卵巢組織(P=0.018、0.031)。
2.在漿液性癌組織中 PD-L1的表達(dá)明顯高于非漿液性癌組織(P=0.011)。血清CA125≤800 U/ml水平患者癌組織中PD-L1的表達(dá)低于CA125>800 U/ml患者(P=0.020)。但在上皮性卵巢癌組織中PD-L1的表達(dá)在不同年齡、FIGO分期、分化程度中表達(dá)卻無(wú)明顯差異(P>0.05), PD-L2的表達(dá)情
10、況在各個(gè)臨床病理參數(shù)之間相比也均無(wú)差異(P>0.05)。
3.根據(jù)上皮性卵巢癌患者1年隨訪結(jié)果,1年內(nèi)死亡和生存的患者癌組織中PD-L1和PD-L2的表達(dá)結(jié)果均未見(jiàn)明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。1年內(nèi)疾病復(fù)發(fā)和疾病無(wú)進(jìn)展的患者癌組織中PD-L1和PD-L2的表達(dá)水平也未觀察到明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
結(jié)論:上皮性卵巢癌患者腹水淋巴細(xì)胞中PD-1表達(dá)水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者;癌組織中PD-L1和PD-
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