循經(jīng)取穴治療慢性穩(wěn)定性心絞痛的靶向代謝組學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  采用超快速液相-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(ultra fast liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UFLC-MS/MS)技術,研究循經(jīng)取穴、他經(jīng)取穴和非經(jīng)非穴對慢性穩(wěn)定性心絞痛(Chronic Stable Angina Pectoris,CSAP)患者血漿目標代謝物的影響,探討不同取穴方式的代謝組學效應差異和規(guī)律,從代謝組學角度為揭示經(jīng)穴效應循經(jīng)特異性提供新的科學依據(jù)。

2、
  方法:
  1、循經(jīng)取穴治療CSAP的臨床研究:采用隨機、對照的臨床研究方法,將符合納入標準的43例慢性穩(wěn)定性心絞痛患者隨機分為循經(jīng)取穴組(A組)、他經(jīng)取穴組(B組)、非經(jīng)非穴組(C組)和基礎治療組(D組),A、B、C組患者在基礎治療的基礎上,按照各自的取穴方案(A組選用內(nèi)關、通里,B組選用太淵、孔最,C組選用非經(jīng)非穴)在4周內(nèi)接受12次電針治療,D組患者僅接受基礎治療。以四周內(nèi)的心絞痛發(fā)作次數(shù)、心絞痛疼痛程度(視覺模

3、擬評分法,Visual Analogue Scale,簡稱VAS評分)、西雅圖心絞痛量表(Seattle Angina Questionnaire,SAQ)評分、6分鐘步行試驗(6Six minutes’ Walk Test,6MWT)、抑郁自評量表(Self-rating depression scale,SDS)和焦慮自評量表(Self-Rating Anxiety Scale,SAS)等作為療效評價指標,分別于入組和治療結束時評價

4、不同取穴方案治療CSAP的臨床效應。
  2、循經(jīng)取穴治療CSAP的血漿代謝組學研究:在入組時和治療四周后采集臨床研究中受試者的血漿樣本,運用HFLC-MS/MS的檢測技術,針對24種目標分子進行靶向代謝組學分析,采用偏最小二乘法(Partial Least Square Discriminant Analysis,PLS-DA)分析等方法,比較不同取穴方式對CSAP血漿代謝物的影響及組間差異,研究循經(jīng)取穴的代謝組學效應特征。

5、r>  3、循經(jīng)取穴治療CSAP的血漿代謝組學與臨床效應相關性研究:運用Pearson線性相關分析等統(tǒng)計學方法,篩選出與循經(jīng)取穴治療CSAP療效相關的代謝物,并分析其代謝通路,確定潛在的生物標志物,探討循經(jīng)取穴的代謝組學效應機制或規(guī)律。
  結果:
  1、循經(jīng)取穴治療CSAP的臨床研究結果
 ?。?)針刺治療四周后,循經(jīng)取穴組患者心絞痛發(fā)作次數(shù)(P=0.000)和心絞痛疼痛程度(P=0.006)顯著降低,SAQ顯著改

6、善,并且療效優(yōu)于其他3組。此外,患者的焦慮程度(P=0.000)和抑郁程度(P=0.011)均得到顯著改善。
  (2)在治療結束時,循經(jīng)取穴組患者的自覺癥狀改善率和自評治療有效率均顯著高于其他三組。
  2、循經(jīng)取穴治療CSAP的血漿代謝組學研究結果
  (1)循經(jīng)取穴組患者血漿中異亮氨酸(P=0.026)、亮氨酸(P=0.027)、酪氨酸(P=0.049)和纈氨酸(P=0.045)的濃度在針刺后有顯著下降,其中甜菜

7、堿、己酸、肌醇、尿素、草酰乙酸、山梨糖醇、次黃嘌呤、高絲氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、亮氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、半乳糖、α-酮戊二酸、果糖和纖維二糖等代謝物對循經(jīng)取穴針刺前后差異的貢獻較大(VIP值>0.8),是關鍵代謝物。
  (2)他經(jīng)取穴組患者針刺治療后血漿代謝小分子均無顯著變化,其中甜菜堿、尿素、半乳糖、果糖和尿酸等代謝物對針刺前后差異的貢獻較大(VIP值>0.8),是關鍵代謝物。
 ?。?)非經(jīng)非穴組患者

8、針刺治療后血漿中甘氨酸濃度顯著增加(P=0.022),其中尿素、半乳糖和果糖等代謝物對針刺前后差異的貢獻較大(VIP值>0.8),是關鍵代謝物。
  (4)基礎治療組患者治療后血漿中蘇氨酸濃度顯著下降(P=0.014),其中半乳糖和果糖等代謝物對治療前后差異的貢獻較大(VIP值>0.8),是關鍵代謝物。
 ?。?)與其他各組相比,循經(jīng)取穴組患者治療后血漿代謝物中尿素水平明顯高于其他三組,而半乳糖和果糖的水平低于其他三組,說明

9、上述3種代謝物可能是顯示循經(jīng)取穴治療效應與其他治療效應差異的潛在生物標記。
  3、循經(jīng)取穴治療CSAP的血漿代謝組學與臨床效應相關性研究結果
  (1)受試者基線期臨床數(shù)據(jù)與血漿代謝小分子濃度的Pearson線性相關分析結果顯示,瓜氨酸與患者心絞痛疼痛程度正相關,苯丙氨酸、亮氨酸和纈氨酸與患者6分鐘步行距離正相關,己酸與患者SAS評分和SDS評分均為正相關。
 ?。?)循經(jīng)取穴組受試者治療前后臨床數(shù)據(jù)改變值與血漿代謝

10、小分子濃度改變值的Pearson線性相關分析結果顯示,異亮氨酸、亮氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、半乳糖、果糖、己酸、苯丙氨酸和瓜氨酸的改變值與患者心絞痛次數(shù)改變值正相關,纖維二糖、尿素、肌醇、山梨糖醇、庚二酸、次黃嘌呤和α-酮戊二酸的改變值與其負相關;己酸的改變值與患者SDS評分變化值正相關,尿酸和甘氨酸的改變值與其負相關。
 ?。?)他經(jīng)取穴組受試者治療前后臨床數(shù)據(jù)改變值與血漿代謝小分子濃度改變值的Pearson線性相關分析結果顯示,次

11、黃嘌呤的改變值與患者心絞痛次數(shù)改變值正相關,甘氨酸的改變值與其負相關;高絲氨酸和酪氨酸的改變值與患者心絞痛VAS改變值負相關;酪氨酸的改變值與患者6分鐘步行距離改變值正相關;酪氨酸、色氨酸和甘氨酸的改變值與患者SAS評分變化值負相關;甘氨酸的改變值與患者SDS評分變化值負相關。
 ?。?)非經(jīng)非穴組受試者治療前后臨床數(shù)據(jù)改變值與血漿代謝小分子濃度改變值的Pearson線性相關分析結果顯示,該組患者治療后代謝分子變化值與臨床癥狀變化

12、值均無明顯相關性。
 ?。?)基礎治療組受試者治療前后臨床數(shù)據(jù)改變值與血漿代謝小分子濃度改變值的Pearson線性相關分析結果顯示,α-酮戊二酸的改變值與患者心絞痛次數(shù)、6分鐘步行距離和SAS評分的改變值均為負相關
  (6)代謝通路分析結果顯示,循經(jīng)取穴引起的代謝改變主要涉及氨基酸和嘌呤代謝以及能量代謝途徑;他經(jīng)取穴引起的代謝改變涉及芳香族氨基酸和嘌呤代謝的代謝途徑;非經(jīng)非穴引起的代謝改變以嘌呤代謝途徑為主,但不涉及其他疾

13、病相關代謝途徑。
  結論:
  1、循經(jīng)取穴治療CSAP的臨床效應優(yōu)于他經(jīng)取穴、非經(jīng)非穴和基礎治療,并且能夠改善患者的焦慮抑郁程度。
  2、四種治療方式對CSAP的血漿代謝物均有一定的調(diào)節(jié)作用,但針對性不同,循經(jīng)取穴影響的代謝分子多,代謝通路廣,與其他各組存在顯著差異。
  3、循經(jīng)取穴和他經(jīng)取穴引起的代謝物改變與其臨床效應存在一定相關性,但循經(jīng)取穴產(chǎn)生的代謝組學效應與心血管相關目標分子關聯(lián)度更高,與臨床療效

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