SHR大鼠腎臟及循環(huán)中CD13表達(dá)水平與原發(fā)性高血壓發(fā)病關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討CD13分子在原發(fā)性高血壓疾病中的表達(dá)水平及其在高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：4周齡SPF級(jí)雄性自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)及其野生對(duì)照組京都維斯塔爾大鼠(Wistar-Kyoto rat，WKY)各32只，按簡(jiǎn)單隨機(jī)法將SHR、WKY大鼠各分為4組，每組8只，分別在4周（0期）、6周（高血壓起始期）、10周（高血壓成型期）、23周（靶器官損害期）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

2、觀察。采用無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)量?jī)x動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)SHR、WKY的血壓情況;應(yīng)用ELISA法動(dòng)態(tài)檢測(cè)上述大鼠的24h尿蛋白情況;Trizol法提取各組大鼠腎臟組織總RNA，并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，RT-PCR法動(dòng)態(tài)檢測(cè)大鼠腎臟中CD13 mRNA的表達(dá)水平;取各組大鼠腎臟皮質(zhì)髓質(zhì)縱切面2mm厚度組織，石蠟法常規(guī)脫水包埋連續(xù)切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)動(dòng)態(tài)檢測(cè)CD13蛋白的表達(dá)水平。應(yīng)用ELISA法動(dòng)態(tài)檢測(cè)CD13、AngⅢ、AngⅣ在大鼠血漿中的表達(dá)水平

3、并分析上述指標(biāo)與SHR血壓變化的相關(guān)性;采用HE及MASSON染色檢測(cè)各期大鼠腎臟病理改變情況。
　　結(jié)果：SHR大鼠體重在觀察期間內(nèi)均低于同期野生對(duì)照WKY大鼠，在6周、10周、23周分別為（160.2±5.3）g vs.（186.8±6.8）g、(230.6±13.5)g vs.（252.3±5.5）g、（310.7±9.1）g vs.（357.4±7.0）g，兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.05）。SHR大鼠血壓值亦高于

4、同期野生對(duì)照WKY大鼠，在6周、10周、23周分別為（128.8±10.3）mmHg vs.（109.1±3.8）mmHg、（152.6±8.6）mmHg vs.（115.5±11.2）mmHg、（203.9±13.2）mmHg vs.（112.9±6.9）mmHg，兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.05）。RT-PCR結(jié)果顯示，SHR腎臟中CD13 mRNA表達(dá)水平高于同期野生對(duì)照WKY大鼠。在6周、10周、23周分別為0.36±0

5、.05 vs.0.25±0.03、0.61±0.08vs.0.28±0.03、0.62±0.09 vs.0.17±0.02，兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.05）。免疫組化染色結(jié)果顯示，SHR腎臟中CD13蛋白表達(dá)水平亦高于同期野生對(duì)照WKY大鼠。在6周、10周、23周分別為0.42±0.12 vs.0.25±0.15、0.57±0.13 vs.0.38±0.09、0.73±0.12 vs.0.37±0.19，兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、（均為P＜0.05）。血漿中CD13的表達(dá)低于同期野生對(duì)照WKY大鼠。在10周、23周分別為（107.4±22.3）ng/L vs.（147.1±25.5）ng/L、（87.04±20.7）ng/L vs.（150.1±31.2）ng/L，兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.05）。此外，SHR大鼠血漿中CD13的變化值與血壓呈負(fù)相關(guān)(r=-0.758，P＜0.05); SHR大鼠血漿中AngⅢ的變化值與血壓呈正相關(guān)(r=0.711,P

7、＜0.05);SHR大鼠血漿中AngⅣ的變化值與血壓呈負(fù)相關(guān)(r=-0.732，P＜0.05);且SHR大鼠血漿中CD13表達(dá)水平動(dòng)態(tài)變化與AngⅢ表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化亦具有負(fù)相關(guān)性(r=-0.746，P＜0.05);SHR大鼠血漿中CD13表達(dá)水平動(dòng)態(tài)變化與AngⅣ表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化亦具有正相關(guān)性（r=0.698，P＜0.05）。HE和MASSON染色結(jié)果顯示，SHR大鼠腎臟微血管周?chē)?、腎小管間質(zhì)膠原沉積多于野生對(duì)照WKY大鼠，在10周