ACE2在WKY和SHR大鼠中的表達及與高血壓的關系.pdf

1、腎素-血管緊張素系統(tǒng)（Renin Angiotensin System，RAS）在心血管功能（調(diào)節(jié)血壓和血容量）、維持體液和電解質(zhì)平衡、細胞生長、組織纖維化等方面都起著十分重要的作用。血管緊張素轉換酶2（Angiotensin converting enzyme2，ACE2）是RAS系統(tǒng)新的調(diào)控因子，研究表明ACE2廣泛參與了高血壓、心衰竭、糖尿病、SARS、肝損傷等疾病的發(fā)生發(fā)展過程。ACE2作為疾病標志物和藥物治療的新靶點而倍受關注

2、，但ACE2參與這些生理和病理過程中的作用機制還不是很清楚。本文選用自發(fā)性高血壓大鼠（Spontaneously hypertensive rat，SHR）和與之匹配的正常WKY大鼠作為試驗動物，研究ACE2及RAS系統(tǒng)其它幾個關鍵調(diào)控因子在WKY和SHR大鼠心臟、腎臟、下丘腦和垂體中的表達，進一步探討ACE2在高血壓形成過程中的相互關系和作用。研究包括兩個部分：
　　 1 ACE，ACE2在WKY，SHR大鼠心臟和腎臟中的表達

3、差異與高血壓的關系
　　 目的通過觀察WKY，SHR大鼠心，腎組織中ACE和ACE2表達的差異，探討ACE與ACE2在自發(fā)性高血壓大鼠高血壓形成中的作用。方法14周齡雄性Wistar-京都種大鼠（WKY）和自發(fā)性高血壓（SHR）大鼠各8只，體重300g左右，自由采食和飲水一周后用BSN-Ⅱ多通道無創(chuàng)測壓系統(tǒng)測定大鼠收縮壓（SBP）、舒張壓（SDP）和心率（HR）并稱重。斷頭處死，采集血液、心臟和腎臟組織。放免法測定血漿中AngⅡ

4、水平；Real-time PCR法比較WKY和SHR大鼠心、腎組織中ACE，AT1R，ACE2和MasR mRNA的表達水平；Western blot法檢測WKY扣SHR大鼠心、腎組織中ACE2的蛋白表達。結果SHR大鼠SBP和DBP均顯著高于WKY大鼠（138.72±4.97VS191.75±4.06，P<0.01；101.68±3.96 VS140.67±4.39，P<0.01）；兩組大鼠心率和體重無顯著差異（P>0.05）；SHR

5、大鼠血漿中AngⅡ水平顯著升高（1.99±0.09 VS2.60±0.08，P<0.05）；與WKY大鼠相比，SHR大鼠心臟和腎臟中ACE mRNA表達均顯著升高（P<0.05），ACE2 mRNA和蛋白表達水平均顯著下降（P<0.05）；心臟和腎臟組織中AT1R和MasR的mRNA表達沒有顯著性變化（P>0.05）。結論（1）ACE與ACE2表達失調(diào)是SHR大鼠高血壓形成的主要原因之一，其機理可能與局部組織RAS系統(tǒng)中ACE-AngⅡ

6、-AT1R通路過度活躍，ACE2-Ang（1-7）-MasR通路相對不足有關（2）ACE與ACE2表達差異可能與大鼠遺傳背景有關。
　　 2 ACE，ACE2在WKY，SHR大鼠下丘腦和垂體中的表達差異與高血壓的關系
　　 目的本研究上一章的研究發(fā)現(xiàn)ACE2在WKY，SHR大鼠心臟和腎臟組織中mRNA和蛋白水平上的表達均存在差異，但ACE2在下丘腦和垂體中的表達情況還不是很清楚，本章目的旨在研究ACE2在下丘腦-垂體軸的

7、表達定位、代謝變化以及與垂體-下丘腦-腎上腺軸激素分泌之間的相互關系和可能的作用機制。方法14周齡雄性Wistar-京都種大鼠（WKY）和自發(fā)性高血壓（SHR）大鼠各8只，體重300g左右，自由采食和飲水一周后斷頭處死，采集血液、下丘腦和垂體組織。進行了如下實驗：
　　 1）放免法測定血漿中CRH、ACTH、Ald和AngⅡ水平；2）Real-time PCR法比較WKY，SHR大鼠下丘腦和垂體中ACE、AT1R、ACE2和Ma

8、sR mRNA的表達水平；
　　 3）Western blot檢測WKY和SHR大鼠下丘腦ACE2的蛋白表達。結果SHR大鼠血漿中CRH、ACTH和Ald水平均顯著低于WKY大鼠（P<0.05），與WSK大鼠相比分別減少了84％、31％和35％，而AngⅡ含量升高了31％（P<0.05）；與WKY大鼠相比，SHR大鼠下丘腦ACE mRNA的表達顯著增加（P<0.05），而ACE2 mRNA和蛋白的表達有下降的趨勢（0.05