亞慢性阿維菌素中毒對(duì)王鴿肝腎細(xì)胞凋亡及CYP450酶系影響的研究.pdf

1、阿維菌素(avermectin，AVM)為農(nóng)畜兩用殺蟲劑，大環(huán)內(nèi)酯類雙糖化合物，具有良好的驅(qū)蟲效果和安全性。隨著AVM的廣泛應(yīng)用，環(huán)境中AVM的蓄積量越來(lái)越多，因此對(duì)生態(tài)系統(tǒng)造成了不良的影響。由于鴿子對(duì)環(huán)境中外源性物質(zhì)的變化比較敏感，因此，被認(rèn)為是監(jiān)測(cè)生態(tài)環(huán)境污染的首選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。本課題以王鴿肝臟和腎臟為研究對(duì)象，采用飼喂添加不同劑量AVM的日糧對(duì)照組飼喂不含AVM的正常日糧、低劑量組含量為20 mg/(kg·diet)、中劑量組40 m

2、g/(kg·diet)、高劑量組60 mg/(kg·diet)，復(fù)制王鴿亞慢性AVM中毒模型。分別在染毒后的第30 d、60 d、90 d采樣，通過(guò)對(duì)王鴿肝腎超微結(jié)構(gòu)及病理組織學(xué)觀察、抗氧化功能、蛋白質(zhì)羰基(PCO)含量、DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)(DPC)率、微粒體細(xì)胞色素P450(CYP450)酶系的含量和活性、細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因（caspase-3、caspase-8和fas）mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，探討AVM對(duì)王鴿肝臟腎臟的毒性作用機(jī)

3、理，為全面評(píng)價(jià)AVM對(duì)禽類的毒理學(xué)機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　 1.通過(guò)HE染色、透射電鏡法觀察到不同劑量的AVM在不同時(shí)間點(diǎn)均能引起王鴿肝腎組織的結(jié)構(gòu)改變，從形態(tài)學(xué)角度證明了AVM能夠引起肝臟腎臟損傷。
　　 2.通過(guò)對(duì)抗氧化相關(guān)指標(biāo)、PCO含量及DPC情況的檢測(cè)，結(jié)果表明，AVM可引起谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性下降，丙二醛(MDA)、PCO含量及DPC率升高，證實(shí)AV

4、M能引起肝腎氧化損傷。
　　 3.采用TUNEL法對(duì)王鴿肝腎細(xì)胞凋亡進(jìn)行檢測(cè)并通過(guò)熒光實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)caspase-3、caspase-8和fas mRNA表達(dá)水平，結(jié)果顯示AVM能夠誘發(fā)王鴿肝腎細(xì)胞凋亡并引起凋亡相關(guān)基因caspase-3、caspase-8和fas mRNA表達(dá)水平增加。
　　 4.通過(guò)對(duì)肝腎微粒體CYP450酶系的含量和活性的檢測(cè)，顯示AVM能夠降低肝腎微粒體細(xì)胞色素P450(CYP450)和

5、b5的含量，抑制NAPDH-細(xì)胞色素C還原酶(CR)、氨基比林-N-脫甲基酶(AND)、紅霉素-N-脫甲基酶(ERND)和苯胺-4-羥化酶(AH)的活性，說(shuō)明P450酶系與氧化應(yīng)激共同參與AVM對(duì)肝腎的損傷過(guò)程。
　　 綜上所述，AVM可干擾肝腎P450酶系的功能和氧化應(yīng)激，導(dǎo)致形態(tài)結(jié)構(gòu)改變，并能通過(guò)上調(diào)caspase-3、caspase-8和fas mRNA表達(dá)誘導(dǎo)肝腎細(xì)胞凋亡的發(fā)生，為進(jìn)一步研究AVM對(duì)生物的影響提供理論依據(jù)