冬凌草甲素對CYP450酶的影響及其機制研究.pdf

1、一直以來，中草藥作為日常生活的營養(yǎng)補充劑或臨床實踐中的治療藥物被廣泛使用。然而，中草藥與其他治療藥物聯(lián)合使用時，其安全性在很大程度上是未知的。許多研究表明，中草藥可以增加其聯(lián)合使用的治療藥物所導(dǎo)致不良事件發(fā)生的風(fēng)險。產(chǎn)生這一現(xiàn)象的主要原因是由于誘導(dǎo)或抑制藥物代謝酶，從而導(dǎo)致被其代謝的治療藥物藥代動力學(xué)特征發(fā)生改變。
　　細(xì)胞色素P450酶(Cytochrome P450，CYP450)是體內(nèi)重要的Ⅰ相代謝酶之一，主要分布于肝臟，腸

2、道及腎臟等組織器官。其功能主要是將外源性或內(nèi)源性物質(zhì)轉(zhuǎn)化為極性衍生物，使這些物質(zhì)可與Ⅱ相代謝酶或藥物轉(zhuǎn)運體結(jié)合進行下一步代謝，從而更易于排出體外。因此，CYP450酶的數(shù)量和活性直接影響藥物在體內(nèi)的代謝活化與外排。
　　冬凌草甲素為唇形科香茶菜屬（Lamiaceae Rabdosia）植物冬凌草中分離出的貝殼杉烯二萜類物質(zhì)，具有抗氧化，保肝及抗腫瘤等藥理作用。其廣泛的生物學(xué)活性和潛在的抗腫瘤作用，使冬凌草甲素成為常用的輔助治療性植

3、物提取物，與其它藥物合用的機率越來越多。但關(guān)于冬凌草甲素對CYP450酶及其它代謝相關(guān)基因的影響暫無報道，因此當(dāng)冬凌草甲素與其它治療藥物聯(lián)合使用時是否存在潛在的藥物-藥物相互作用尚不清楚。
　　本課題以研究冬凌草甲素對CYP450酶及其它代謝相關(guān)基因的影響為主要目的，進行了如下實驗:
　　(1)建立了表達核受體hPXR及CYP3A4啟動子的熒光報告基因平臺，對22種常用的中藥單體化合物進行篩選，發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素，川芎嗪，石杉堿

4、甲具有較強的hPXR激活作用。
　　(2)在人源化hPXR小鼠體內(nèi)進行體內(nèi)試驗，觀察冬凌草甲素對hPXR下游調(diào)控基因的表達及功能活性的影響。實驗結(jié)果表明冬凌草甲素對Cyp3a11、Cyp2a4及Cyp2c家族的表達及活性均勻誘導(dǎo)作用。同時，電子供體POR的mRNA表達也有顯著升高。
　　(3)在LS174T細(xì)胞中對各主要的CYP450酶進行研究，發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素可使CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2D6、CYP

5、2E1、CYP3A4和POR的mRNA表達水平顯著升高，并可在細(xì)胞水平誘導(dǎo)CYP2A6、CYP2C9和CYP3A4的活性。
　　(4)在C57BL/6小鼠體內(nèi)對各主要的CYP450酶進行研究，發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素可使Cyp1a1、Cyp1a2、Cyp2a4、Cyp2c37、Cyp2c39、Cyp2c40、Cyp2d9、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11以及核受體CAR，PXR與電子供體POR的mRNA表達增加。同時，使Cyp1