亞慢性阿維菌素中毒致王鴿神經(jīng)細胞凋亡的研究.pdf

1、阿維菌素(avermectin，AVM)是一種高效、廣譜的農(nóng)畜兩用殺蟲劑，具有優(yōu)良的驅蟲效果及安全性，但是隨著AVM用量的不斷加大，環(huán)境中AVM的蓄積量也不斷增多，已經(jīng)對生態(tài)系統(tǒng)造成了不良的影響。鴿子及鵪鶉因其對環(huán)境中化學物質的變化比較敏感，因此，被認為是監(jiān)測生態(tài)環(huán)境的首選生物。本課題以王鴿腦神經(jīng)組織為研究對象，采用給王鴿飼喂添加不同劑量AVM的日糧(對照組飼喂不含AVM的全價日糧、低劑量組20 mg/(kg·diet)、中劑量組40

2、mg/(kg·diet)、高劑量組60 mg/(kg·diet)的染毒方法，復制王鴿亞慢性AVM中毒模型。在染毒后的第30d、60d、90d分別采樣，通過對王鴿腦神經(jīng)系統(tǒng)病理組織學、超微結構、抗氧化功能、DNA損傷、細胞凋亡及bcl-2、α-Syn mRNA表達水平的檢測和觀察，進而探討AVM對王鴿腦神經(jīng)系統(tǒng)細胞凋亡的時間-劑量-效應關系。研究結果如下：
　　 1.應用HE染色、透射電鏡以及TUNEL法，觀察不同劑量AVM在不同

3、時間對王鴿腦神經(jīng)組織毒性作用，從形態(tài)學角度驗證了AVM能夠引發(fā)神經(jīng)細胞凋亡，其細胞凋亡率與AVM作用程度呈正相關。
　　 2.通過對抗氧化相關指標以及蛋白質羰基含量情況的檢測，證實AVM能引起神經(jīng)細胞氧化損傷，結果表明，AVM致谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性下降，超氧化物歧化酶(SOD)活性降低，丙二醛(MDA)含量增加及蛋白質羰基含量增加，且呈劑量-效應關系，說明AVM造成王鴿腦神經(jīng)組織發(fā)生氧化損傷，影響其正常的生理機

4、能，進一步誘導細胞凋亡的發(fā)生。
　　 3.應用KCI-SDS沉淀法檢測DNA-蛋白質交聯(lián)率，結果表明，AVM能夠引起王鴿腦神經(jīng)組織DNA-蛋白質交聯(lián)率升高，且呈劑量.效應關系，說明AVM可損傷王鴿腦神經(jīng)組織的DNA，DNA損傷可以進一步誘導細胞凋亡的發(fā)生。
　　 4.應用熒光實時定量PCR法檢測細胞內α-Syn、bcl-2 mRNA表達水平，結果顯示AVM能夠引起王鴿腦神經(jīng)組織內α-Syn mRNA表達水平增加，凋亡的標