柑橘果實(shí)發(fā)育過程中檸檬酸積累相關(guān)基因表達(dá)分析.pdf

1、檸檬酸是決定柑橘類水果風(fēng)味品質(zhì)的重要因素。檸檬酸的積累是一個(gè)復(fù)雜而精密的代謝過程，受其合成、分解利用及貯藏運(yùn)輸三者的共同調(diào)控。由于不同品種的柑橘果實(shí)檸檬酸的積累含量和模式不同，因此系統(tǒng)分析不同品種果實(shí)發(fā)育過程中檸檬酸積累相關(guān)基因的變化，確定導(dǎo)致檸檬酸積累動態(tài)差異的關(guān)鍵基因，對完善柑橘果實(shí)檸檬酸積累理論，提高果實(shí)風(fēng)味品質(zhì)具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)先以溫州蜜柑和早香柚為材料，系統(tǒng)比較果實(shí)發(fā)育過程中檸檬酸積累動態(tài)與檸檬酸積累相關(guān)基因的表達(dá)關(guān)系，確定

2、影響柑橘果實(shí)檸檬酸積累的可能關(guān)鍵因子。然后再以紐荷爾臍橙、檸檬和無酸柚為材料，比較分析不同品種的柑橘果實(shí)檸檬酸積累動態(tài)與可能關(guān)鍵因子的表達(dá)關(guān)系。綜合以上兩部分結(jié)果，初步確定影響柑橘果實(shí)發(fā)育過程中檸檬酸動態(tài)積累的關(guān)鍵因子。實(shí)驗(yàn)主要研究結(jié)果如下:
　　1.不同品種的柑橘果實(shí)在發(fā)育過程中檸檬酸的積累水平具有差異。測定檸檬酸的積累動態(tài)可知，在試驗(yàn)采樣期間，溫州蜜柑和早香柚的檸檬酸積累先上升后下降，紐荷爾臍橙的檸檬酸積累逐漸下降;檸檬的檸檬

3、酸積累逐漸上升;無酸柚持續(xù)低積累檸檬酸。
　　2.在常規(guī)檸檬酸積累模式的柑橘果實(shí)中（即溫州蜜柑、早香柚、紐荷爾臍橙），其檸檬酸積累主要與Mit-Aco、CsCit1的負(fù)調(diào)控和質(zhì)子泵的正調(diào)控有關(guān)，但溫州蜜柑果實(shí)中的檸檬酸在液泡中的積累與V-PPase和V-ATPase有關(guān)，而早香柚和紐荷爾臍橙則與CsPH8有關(guān)。
　　3.在檸檬酸積累持續(xù)上升模式的柑橘果實(shí)（即高酸檸檬）中，檸檬酸積累與Mit-Aco低活性、CsPH8的上調(diào)表達(dá)

4、、CsCit1的低表達(dá)有關(guān)。
　　4.在檸檬酸持續(xù)低積累模式的柑橘果實(shí)（即無酸柚）中，檸檬酸積累與Mit-Aco高活性、CsPH8和VHP3的低表達(dá)和CsCit1的高表達(dá)有關(guān)。
　　通過比較這幾個(gè)不同積累模式柑橘果實(shí)的檸檬酸積累相關(guān)基因的表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，決定柑橘果實(shí)中不同檸檬酸積累模式差異的關(guān)鍵因子可能是Mit-Aco、蛋白載體(CsCit1)和質(zhì)子泵（V-PPase、V-ATPase和CsPH8），而決定檸檬酸積累常規(guī)模式和