黃瓜果實(shí)發(fā)育相關(guān)的基因克隆與表達(dá)及蛋白組學(xué)分析.pdf

1、黃瓜（CucumissativusL.）是一種重要的的經(jīng)濟(jì)作物和研究性別決定、核質(zhì)互作和韌皮部生理機(jī)能等生理機(jī)制的理想模式植物。黃瓜單性結(jié)實(shí)是與黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)密切相關(guān)的重要經(jīng)濟(jì)性狀，是保護(hù)地專用黃瓜品種的目標(biāo)性狀。生長(zhǎng)素響應(yīng)因子(Auxinresponsefactor，ARF)是一類調(diào)控生長(zhǎng)素應(yīng)答基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子，能特異性激活或抑制下游生長(zhǎng)素應(yīng)答基因的表達(dá)，在植物生長(zhǎng)發(fā)育的多個(gè)過程都有重要功能。本文研究之一是研究黃瓜生長(zhǎng)素響應(yīng)因子Cs

2、ARF10亞家族3個(gè)基因的克隆與表達(dá)分析，試圖闡明黃瓜CsARF10亞家族基因在黃瓜生長(zhǎng)發(fā)育，特別是果實(shí)發(fā)育過程中的作用。本文研究之二是從蛋白組學(xué)的角度，全面地，整體地研究分析了CPPU處理對(duì)黃瓜果實(shí)發(fā)育相關(guān)的生理機(jī)制的影響，闡明黃瓜果實(shí)發(fā)育的生理機(jī)制，為黃瓜的遺傳改良提供重要依據(jù)。具體研究如下:
　　1.黃瓜生長(zhǎng)素響應(yīng)因子CsARF10亞家族3個(gè)基因的克隆與表達(dá)分析
　　克隆獲得了3條生長(zhǎng)素響應(yīng)因子ARF10基因序列，分別

3、命名為CsARF10a，CsARF10b和CsARF10c。發(fā)現(xiàn)CsARF10a與番茄SlARF10基因具有較近的進(jìn)化距離，而CsARF10b和CsARF10c與擬南芥AtARF10具有更高的相似性;還發(fā)現(xiàn)CsARF10家族基因的啟動(dòng)子具有多樣化的激素應(yīng)答元件。另外CsARF10家族基因在黃瓜幼葉中經(jīng)不同NAA濃度處理以及其他激素的處理呈現(xiàn)不同的表達(dá)模式;并在黃瓜幼苗的根、莖、葉及雄花中都具有較高的轉(zhuǎn)錄水平;在黃瓜果實(shí)發(fā)育的早期具有相同

4、的表達(dá)趨勢(shì)，但CsARF10a的轉(zhuǎn)錄水平較高，而CsARF10b和CsARF10c表達(dá)量較低。
　　2.CPPU處理對(duì)黃瓜果實(shí)發(fā)育調(diào)控的蛋白組學(xué)分析
　　研究表明，與黃瓜果實(shí)發(fā)育過程相關(guān)的蛋白主要涉及脅迫響應(yīng)、生物合成與降解、胚胎發(fā)育過程、碳水化合物及能量代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和次生代謝相關(guān)的生命過程，以1.5倍上下調(diào)控篩選差異蛋白點(diǎn)，共獲得78個(gè)，23個(gè)蛋白上調(diào)表達(dá)，55個(gè)蛋白下調(diào)表達(dá)。上調(diào)的蛋白中，15個(gè)蛋白涉及細(xì)胞的相關(guān)過程，