發(fā)育信號SHH誘導恒河猴骨髓間質干細胞分化為神經(jīng)樣細胞的信號機制研究.pdf

1、針對骨髓干細胞定向誘導分化中存在的關鍵問題——細胞發(fā)育和命運決定中的信號調控機制不明確，研究神經(jīng)發(fā)育調控因子Shh誘導的恒河猴骨髓間質干細胞向神經(jīng)細胞誘導分化過程中，SHH信號系統(tǒng)和MAPK激酶系統(tǒng)的信號通路，深入探討其調控機制。研究結論如下: 1.建立了體外培養(yǎng)擴增恒河猴骨髓MSCs的簡便、穩(wěn)定、高效的方法，證實所分離的細胞為骨髓MSCs，具有較強的增殖潛能，均一性較好，純度較高，說明MSCs是一種較為理想的種子細胞。

2、 2.建立了一種新的Shh誘導方案，成功誘導MSC向神經(jīng)樣細胞分化，分化后細胞表達神經(jīng)干細胞標志物Nestin，神經(jīng)元標志物NSE,NF-M,Tau、突觸素和膠質細胞標志物GFAP。證實RA誘導方案能夠誘導MSC向神經(jīng)樣細胞分化，表達Nestin},NSE,NF-M,Tau、突觸素和GFAP，兩種方案沒有發(fā)現(xiàn)顯著效率差異。但Shh能夠誘導細胞出現(xiàn)典型少而長的軸突形態(tài)。免疫組化與電鏡證據(jù)均表明，本文建立的Shh誘導方案是一種有效的神經(jīng)誘導

3、方案。 3.Shh誘導方案通過持續(xù)激活特異性受體ptc途徑參與MSC向神經(jīng)樣細胞分化。RA誘導方案通過短暫激活選擇性受體RAR途徑參與細胞分化，而后這一反應可能被反饋抑制，其深入機制有待進一步研究。Shh與RA兩種誘導方案之間沒有顯著受體途徑交叉。 4.MAPK信號轉導通路參與Shh誘導MSC分化為神經(jīng)樣細胞的信號傳遞，p38信號轉導通路被激活，ERK1/2信號通路被抑制;p38信號傳遞系統(tǒng)抑制劑SB203580可使MS