高糖對Schwann細胞生長、凋亡的影響及其機制的研究.pdf

1、目的：研究高糖對體外培養(yǎng)的Schwann細胞生長、凋亡的影響及其作用機制 方法：體外建立高糖培養(yǎng)的Schwann細胞模型，按照培養(yǎng)液中葡萄糖濃度的不同，將實驗分為對照組(30mmol/L)與高糖組(60mmol/L，90mmol/L)。流式細胞儀檢測Schwann細胞內(nèi)ROS含量；分光光度法檢測細胞培液上清中GSH的含量；MTT法觀察Schwann細胞活力及生長情況；TUNEL檢測細胞的凋亡；RT-PCR檢測細胞Caspase-

2、3 mRNA的表達；Western Blot檢測Schwann細胞抗凋亡蛋白Bcl-2及凋亡蛋白Bax的表達情況，同時檢測 p38MAPK磷酸化的程度。 結(jié)果：①高糖組Schwann細胞內(nèi)ROS含量遠遠高于對照組，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.01)；同時，高糖組細胞培液上清中GSH分泌量明顯低于對照組（P﹤0.01）。②高糖組細胞生長受到抑制，培養(yǎng)液糖濃度60mmol/L及90mmol/L組均有抑制作用（P﹤0.05），且90mm

3、ol/L組的抑制作用強于60mmol/L組（P﹤0.05）；細胞凋亡結(jié)果顯示高糖組細胞凋亡數(shù)目明顯增多，凋亡率與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P﹤0.05）；RT-PCR結(jié)果顯示高糖組Caspase-3 mRNA的表達量較對照組明顯升高（P﹤0.05），且隨著培液中葡萄糖濃度的升高，Caspase-3表達也相應(yīng)增高。③Western Blot結(jié)果顯示高糖組Bcl-2蛋白表達下降（P﹤0.05），且90mmol/L組具有非常顯著性差異（P﹤0.

4、01）；高糖組Bax蛋白表達升高，結(jié)果與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義（P﹤0.05）；高糖組磷酸化p38MAPK的相對表達量明顯高于對照組（P﹤0.01）。 結(jié)論：高糖抑制Schwann細胞生長，促進細胞凋亡。其可能的作用機制是：高糖引起Schwann細胞內(nèi)ROS含量增加，抗氧化劑GSH分泌減少，從而產(chǎn)生氧化應(yīng)激作用；氧化應(yīng)激激活Schwann細胞的p38MAPK信號通路，有活性的磷酸化p38MAPK含量升高，誘導(dǎo)細胞抗凋亡蛋白Bcl