基于工具酶擴(kuò)增和納米金比色構(gòu)建DNA信號(hào)放大新方法的研究.pdf

1、DNA在生物傳感器和功能納米材料的構(gòu)建中有著廣泛的應(yīng)用。DNA信號(hào)放大常用于構(gòu)建高靈敏性的分析技術(shù)，尤其應(yīng)用于痕量分析物的檢測(cè)。具有特殊性質(zhì)或結(jié)構(gòu)的金屬納米材料也經(jīng)常與DNA聯(lián)用，進(jìn)行新型傳感器的設(shè)計(jì)或功能化納米材料的開發(fā)，例如，具有特殊光學(xué)性質(zhì)的納米金就已廣泛應(yīng)用于生物傳感器的設(shè)計(jì)。
　　DNA技術(shù)由于可以實(shí)現(xiàn)多種形式的信號(hào)放大而在分析化學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。傳統(tǒng)的DNA信號(hào)放大的方式，如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase

2、Chain Reaction，PCR)，依賴于熱變性、工具酶和必要的儀器才能實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)的擴(kuò)增，很難滿足于發(fā)展快速、簡便、易操作、便于觀察的分析技術(shù)。因此，研究新型、恒溫以及無酶參與的DNA信號(hào)放大方法具有非常重要的意義。本論文中，我們基于工具酶擴(kuò)增和納米金比色構(gòu)建了兩種DNA信號(hào)放大的新方法。
　　一，我們將聚合酶和切刻酶聯(lián)用，設(shè)計(jì)了一種核酸恒溫?cái)U(kuò)增的新方法并用于miRNA的檢測(cè)。在目標(biāo)miRNA的含量為10-16-10-13mo

3、l范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果具有良好的線性;通過對(duì)不同堿基序列的miRNA進(jìn)行檢測(cè)，驗(yàn)證了這種方法具有良好的特異性;通過對(duì)血清中樣品的檢測(cè)，檢驗(yàn)了這種方法的實(shí)用性。
　　二，我們將DNA修飾的納米金與雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Hybridization Chain Reaction，HCR）相結(jié)合，構(gòu)建了一種無酶參與的DNA信號(hào)放大的新型比色方法。這種方法簡單，靈敏度高，不需要酶參與，利用這種方法進(jìn)行目標(biāo)的比色分析，僅用肉眼就可以檢測(cè)到0.5nM的目標(biāo)