糞臭素對(duì)幾種重要消化酶部分性質(zhì)影響的研究.pdf

1、糞臭素即3-甲基吲哚，有極強(qiáng)的糞臭味，是人和動(dòng)物體內(nèi)色氨酸的代謝產(chǎn)物，人攝取的很多食物中（如多種肉類等）本身也含有糞臭素。糞臭素對(duì)人、動(dòng)物及環(huán)境均有一定的危害作用，含有糞臭素或可以轉(zhuǎn)變?yōu)榧S臭素的外源性食物進(jìn)入體內(nèi)后，糞臭素將不可避免地與動(dòng)物和人體內(nèi)的消化酶發(fā)生作用，人和動(dòng)物通過(guò)皮膚吸收的來(lái)自外界環(huán)境中的糞臭素也有可能與體內(nèi)的消化酶發(fā)生作用，因此我們研究了糞臭素對(duì)幾種重要消化酶部分性質(zhì)的影響。我們選擇了在消化淀粉和糖類物質(zhì)中起重要作用的α

2、-淀粉酶以及在蛋白質(zhì)消化過(guò)程中起主要作用的胃蛋白酶和胰蛋白酶。本文首先研究了糞臭素對(duì)α-淀粉酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶活性的影響，接著通過(guò)紫外光譜法和熒光光譜法進(jìn)一步研究了糞臭素對(duì)這三種重要消化酶結(jié)構(gòu)的影響。 研究發(fā)現(xiàn)糞臭素對(duì)三種消化酶均有一定程度的抑制作用，其對(duì)胰蛋白酶的抑制率最高，對(duì)胃蛋白酶的抑制率最低。當(dāng)糞臭素與酶的終濃度比為5／1時(shí)，糞臭素對(duì)這三種酶的抑制率分別達(dá)到32.4％、28.7％及26.6％。 當(dāng)向三種消

3、化酶中加入不同濃度的糞臭素時(shí)，隨著糞臭素濃度的增加，α-淀粉酶在265 nm附近、胃蛋白酶在275 nm附近及胰蛋白酶在270 nm附近的紫外吸收峰均有一定程度的升高。 通過(guò)實(shí)驗(yàn)我們得知糞臭素對(duì)三種消化酶的內(nèi)源熒光均有很強(qiáng)的猝滅作用，根據(jù)Stem-Volmer方程作糞臭素對(duì)三種消化酶猝滅的F<,0>／F～［Q］曲線，可得出糞臭素對(duì)α-淀粉酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶的的表觀猝滅常數(shù)Kq分別為2.42×10<'12>L/mol·s、1

4、.93×10<'12> L/mol·s及2.72×10<'12> L/mol·s，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于各種猝滅劑對(duì)生物大分子的最大擴(kuò)散碰撞常數(shù)2.0×10<'10> L/mol·s，表明糞臭素對(duì)三種酶的熒光猝滅并不是由于分子擴(kuò)散和動(dòng)態(tài)碰撞引起的，很可能是由于有機(jī)小分子糞臭素“鑲嵌”于酶分子之間，彼此結(jié)合形成了某種特定結(jié)構(gòu)的締合物而引起的靜態(tài)猝滅。以lg［（F<,0>-F）/F］對(duì)lg［Q］作線性擬合，即可求出糞臭素與三種酶的結(jié)合常數(shù)K和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n