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1、該研究利用基因組信息學(xué)方法,根據(jù)EST數(shù)據(jù)庫(kù)中與編碼HCF蛋白N端β螺旋槳結(jié)構(gòu)域cDNA序列同源的EST設(shè)計(jì)引物、制備探針,在人胎腦文庫(kù)中篩選到一個(gè)新的全長(zhǎng)為1680bp的cDNA克隆,此cDNA的開(kāi)放讀碼框?yàn)?221bp,編碼一個(gè)全長(zhǎng)為406個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì).同源性分析結(jié)果表明,此蛋白質(zhì)與HCF-1的β螺旋槳結(jié)構(gòu)域有30﹪的相同性和45﹪的相似性,推測(cè)其整個(gè)蛋白形成一個(gè)6葉槳的β螺旋槳結(jié)構(gòu).因此我們將新克隆的基因命名為HCF-li
2、ke kelch repeat protein 1,HCLP-1(AF113131).為了分析新基因HCLP-1的組織表達(dá)譜,我們進(jìn)行了Northern雜交實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示HCLP-1在進(jìn)行研究的組織和腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá),證明HCLP-1是一個(gè)廣泛表達(dá)的基因.蛋白質(zhì)在細(xì)胞中的定位信息,對(duì)蛋白質(zhì)的功能有重要提示作用.為了對(duì)HCLP-1蛋白進(jìn)行功能鑒定,我們首先應(yīng)用共聚焦顯微鏡技術(shù),研究了HCLP-1蛋白的亞細(xì)胞定位情況,結(jié)果證實(shí)HCLP-1
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