山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的分離培養(yǎng).pdf

1、本研究對山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞進行體外培養(yǎng)，探討山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的分離與體外培養(yǎng)條件、生長特點及其增殖過程。試驗采用不同的消化方法獲取山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞，通過原代培養(yǎng)、免疫組織化學鑒定、傳代培養(yǎng)、生長曲線測定、細胞凍存等試驗，觀察山羊子宮內(nèi)膜細胞在體外培養(yǎng)過程中的生長特性，并找出細胞傳代最佳密度、凍存的最佳方法。結(jié)果表明： 1.在37℃條件下，采用2g/L的膠原酶I消化3～4h效果最好，細胞懸液粘稠度小，腺團較大，腺團與單個

2、細胞易分離。經(jīng)200目濾網(wǎng)過濾－低速離心－沉淀三個步驟分離懸液中的單個細胞，得到的細胞量大，而且純凈。 2.細胞在培養(yǎng)0.5h左右開始貼壁，在培養(yǎng)過程中逐漸呈現(xiàn)多角形和紡錘形，細胞核呈卵圓形，3-4d即鋪成單層，細胞間存在重疊生長現(xiàn)象；利用免疫組織化學染色法做鑒定，2種形態(tài)的細胞均表達波形蛋白，陽性率可達95％以上，不表達角蛋白，證明所得到的細胞為子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞。 3.傳代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞以1×105/mL的密度接種，