緩激肽在大鼠血栓閉塞性脈管炎模型中的表達(dá).pdf

1、血栓閉塞性脈管炎(ThromboangiitisObliterans,ATO)是常見(jiàn)的周?chē)鷦?dòng)脈慢性閉塞性疾病之一,也是導(dǎo)致青壯年人截肢的最常見(jiàn)血管疾病。
　　 ATO是一種非動(dòng)脈硬化性、炎癥性、四肢中小動(dòng)脈及靜脈閉塞性疾病,病變主要累及四肢遠(yuǎn)端的中、小動(dòng)脈及伴行靜脈,遠(yuǎn)端的動(dòng)脈閉塞有時(shí)可伴有血栓性靜脈炎。早在1908年,LeoBuerger就認(rèn)識(shí)到這個(gè)特別好發(fā)于年輕人的血管炎癥性疾病-血栓閉塞性脈管炎,但是一個(gè)世紀(jì)后,對(duì)TAO的

2、發(fā)病機(jī)制和病因仍然所知甚少。
　　 TAO病因不明,病情復(fù)雜,在治療上非常困難,外科治療雖然可以緩解缺血的癥狀,但是常常由于缺少合適的流出道而失敗。
　　 目前,已有不少文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)用緩激肽(bradykinin,BK)治療心肌梗死及缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究和臨床研究,但是關(guān)于BK與下肢動(dòng)脈缺血性疾病的關(guān)系的研究報(bào)道很少。本課題的目的就是通過(guò)建立TAO大鼠模型,觀察大鼠血栓閉塞性脈管炎模型中緩激肽的表達(dá)水平,探討其在血栓閉

3、塞性脈管炎發(fā)病過(guò)程中的意義。
　　 首先應(yīng)用月桂酸鈉成功的建立ATO大鼠模型。購(gòu)買(mǎi)雄性Wistar大白鼠35只,體重約500g左右。隨機(jī)分為對(duì)照組5只和模型組30只。模型組又分為1天、3天、7天、14天、21天、28天六個(gè)組別。模型組各組別均設(shè)5只實(shí)驗(yàn)大鼠。在顯微鏡下完成手術(shù),向股動(dòng)脈遠(yuǎn)心端注入月桂酸鈉溶液。
　　 模型組分別于術(shù)后1天,3天,7天,14天,21天,28天經(jīng)尾靜脈穿刺采集靜脈血2ml,置于抗凝管,3000

4、r／min,4℃離心15分鐘后,取上清,-20℃保存?zhèn)溆?。?duì)照組于術(shù)后第28天取血。大鼠術(shù)前血清均于手術(shù)前48小時(shí)時(shí)經(jīng)尾靜脈采集。ELISA法分別測(cè)定各組大鼠血清中緩激肽水平,并對(duì)各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果表明,動(dòng)物模型制作是成功的,通過(guò)病理HE染色觀察,發(fā)現(xiàn)與ATO特征性的病理表現(xiàn)相似。注射月桂酸鈉后大鼠肢體出現(xiàn)不同程度的缺血壞死。病理切片示大量新生血管與炎性細(xì)胞浸潤(rùn),與對(duì)照組相比,隨著缺血時(shí)間的延長(zhǎng),模型鼠血清

5、緩激肽水平呈升高趨勢(shì),至第14天達(dá)到最高峰,之后開(kāi)始下降,但仍高于術(shù)前水平(P<0.05)。
　　 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),在大鼠血栓閉塞性脈管炎模型中,隨著缺血時(shí)間的延長(zhǎng)。血清緩激肽水平逐漸提高,并以兩周組升高最為顯著(與術(shù)前組及對(duì)照組相比P=0.001<0.05),且兩周組時(shí)大體標(biāo)本及病理切片均可觀察到有大量的新生毛細(xì)血管生成。后隨著肢體的脫落,BK表達(dá)水平又逐漸減低,但與術(shù)前血清相比仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。