緩激肽在大鼠血栓閉塞性脈管炎模型中的表達.pdf

1、血栓閉塞性脈管炎(ThromboangiitisObliterans,ATO)是常見的周圍動脈慢性閉塞性疾病之一,也是導(dǎo)致青壯年人截肢的最常見血管疾病。
　　 ATO是一種非動脈硬化性、炎癥性、四肢中小動脈及靜脈閉塞性疾病,病變主要累及四肢遠端的中、小動脈及伴行靜脈,遠端的動脈閉塞有時可伴有血栓性靜脈炎。早在1908年,LeoBuerger就認識到這個特別好發(fā)于年輕人的血管炎癥性疾病-血栓閉塞性脈管炎,但是一個世紀(jì)后,對TAO的

2、發(fā)病機制和病因仍然所知甚少。
　　 TAO病因不明,病情復(fù)雜,在治療上非常困難,外科治療雖然可以緩解缺血的癥狀,但是常常由于缺少合適的流出道而失敗。
　　 目前,已有不少文獻報道應(yīng)用緩激肽(bradykinin,BK)治療心肌梗死及缺血再灌注損傷的實驗研究和臨床研究,但是關(guān)于BK與下肢動脈缺血性疾病的關(guān)系的研究報道很少。本課題的目的就是通過建立TAO大鼠模型,觀察大鼠血栓閉塞性脈管炎模型中緩激肽的表達水平,探討其在血栓閉

3、塞性脈管炎發(fā)病過程中的意義。
　　 首先應(yīng)用月桂酸鈉成功的建立ATO大鼠模型。購買雄性Wistar大白鼠35只,體重約500g左右。隨機分為對照組5只和模型組30只。模型組又分為1天、3天、7天、14天、21天、28天六個組別。模型組各組別均設(shè)5只實驗大鼠。在顯微鏡下完成手術(shù),向股動脈遠心端注入月桂酸鈉溶液。
　　 模型組分別于術(shù)后1天,3天,7天,14天,21天,28天經(jīng)尾靜脈穿刺采集靜脈血2ml,置于抗凝管,3000

4、r／min,4℃離心15分鐘后,取上清,-20℃保存?zhèn)溆?。對照組于術(shù)后第28天取血。大鼠術(shù)前血清均于手術(shù)前48小時時經(jīng)尾靜脈采集。ELISA法分別測定各組大鼠血清中緩激肽水平,并對各組實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果表明,動物模型制作是成功的,通過病理HE染色觀察,發(fā)現(xiàn)與ATO特征性的病理表現(xiàn)相似。注射月桂酸鈉后大鼠肢體出現(xiàn)不同程度的缺血壞死。病理切片示大量新生血管與炎性細胞浸潤,與對照組相比,隨著缺血時間的延長,模型鼠血清

5、緩激肽水平呈升高趨勢,至第14天達到最高峰,之后開始下降,但仍高于術(shù)前水平(P<0.05)。
　　 本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),在大鼠血栓閉塞性脈管炎模型中,隨著缺血時間的延長。血清緩激肽水平逐漸提高,并以兩周組升高最為顯著(與術(shù)前組及對照組相比P=0.001<0.05),且兩周組時大體標(biāo)本及病理切片均可觀察到有大量的新生毛細血管生成。后隨著肢體的脫落,BK表達水平又逐漸減低,但與術(shù)前血清相比仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。