大鼠血栓閉塞性脈管炎模型的建立與丹參提取物防治作用初步觀察.pdf

1、目的：建立大鼠血栓閉塞性脈管炎(TAO)模型和模型壞疽程度評(píng)價(jià)指標(biāo)；初步觀察丹參提取物的防治作用。 方法： 雄性Wistar大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，假手術(shù)組、2.0mg 月桂酸(LauricAcid，LA) 組、1.5mgLA 組、1.0mgLA 組和 0.5mgLA 組，假手術(shù)組右側(cè)股動(dòng)脈注入0.1 ml 生理鹽水，其它四組分別注入 0.1ml 不同濃度的LA溶液。注射后，觀察大鼠肢體變化情況，主要觀察患

2、肢皮膚顏色、腫脹、壞疽和木乃伊化程度，持續(xù)兩周。采用壞疽程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)和壞疽指數(shù)(GI)記錄造模后1天、4天、7天、14天的病變進(jìn)展。造模后第15天，測(cè)定各組的全血粘度、血漿粘度、血沉、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞相關(guān)指數(shù)、血漿纖維蛋白原等指標(biāo)，分析血液流變學(xué)變化情況；常規(guī)H-E染色和三色染色(Masson 法)觀察大鼠肢體的病理變化和進(jìn)行血栓計(jì)數(shù)；測(cè)量微血管密度值推斷在缺血缺氧狀態(tài)下機(jī)體形成側(cè)枝血管的能力。 進(jìn)一步優(yōu)化TAO模型。雄性Wi

3、star大鼠24只，隨機(jī)分為3組，0.8mgLA組(n=10)、0.6mgLA組(n=10)和0.4mgLA 組(n=4)。右側(cè)股動(dòng)脈注射相應(yīng)濃度的LA溶液0.1ml。觀察指標(biāo)同上。 觀察丹參提取物的防治作用。雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只，假手術(shù)組、模型組、紫花丹參水提物組(SM-A)、白花丹參水提物組 (SMA-A)、白花丹參醇提物組(SMA-E)。造模前12小時(shí)，SM-A組、SMA-A組和SMA-E組給

4、予相應(yīng)的提取物(20g/kg 生藥濃度)灌胃，假手術(shù)組、模型組給予等體積生理鹽水灌胃。每天一次，共兩周。壞疽程度的評(píng)價(jià)采用GI，記錄術(shù)后1天、4天、7天、14天的GI，其余觀察指標(biāo)同上。 結(jié)果： 1.LA 劑量與模型損傷出現(xiàn)的時(shí)間以及損傷的嚴(yán)重程度有密切相關(guān)。2.0mg 和1.5mgLA 組的病變進(jìn)展速度快，在造模后第4天，多數(shù)大鼠壞疽范圍超過(guò)踝關(guān)節(jié)，第14天壞疽范圍接近膝關(guān)節(jié)。1.0mg 和 0.8mgLA 組病變進(jìn)展

5、較為緩慢，到第7天，僅部分大鼠壞疽范圍超過(guò)踝關(guān)節(jié)，第14天壞疽范圍在踝關(guān)節(jié)附近。0.5mg和0.6mgLA組多數(shù)大鼠壞疽僅局限于足掌前端。0.4mgLA組未出現(xiàn)肢體損傷。 0.8mg、1.0mg、1.5mg 和 2.0mgLA 組在造模后第7和14天的壞疽程度分級(jí)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。0.8mgLA 組的GI，在造模后第1、4、7天明顯低于2.0mg、1.5mg和1.0mgLA組(P<0.05)。 與假手術(shù)組相比，0.8mg、1

6、.0mg、1.5mg 和 2.0mgLA 組的低切變率下全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、血漿纖維蛋白原、血栓形成數(shù)明顯增高(P<0.05)。而微血管密度(MVD) 僅 0.6mg 和 0.8mgLA 組增高明顯。 2.SMA-E 組、SMA-A 組和SM-A組第4天的GI明顯減小，全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞變性指數(shù)和血漿纖維蛋白原的含量比模型組明顯降低 (P<0.05)。SMA-E組的微血管密度高于假手術(shù)組和模型組(P<0.