VEGF在血栓閉塞性脈管炎大鼠模型中的表達(dá)及環(huán)磷酰胺應(yīng)用觀察.pdf

1、血栓閉塞性脈管炎(ThromboangiitisObliterans，TAO)是一種非動(dòng)脈硬化性、炎癥性、四肢中小動(dòng)脈及靜脈閉塞性疾病，病變主要累及四肢遠(yuǎn)端的中、小動(dòng)脈及伴行靜脈。?？蓪?dǎo)致嚴(yán)重的肢體功能障礙，而必須進(jìn)行截肢。由于本病主要發(fā)生于男性青壯年，病殘率較高、易復(fù)發(fā)的特點(diǎn)，嚴(yán)重影響了病人的生活和工作。 自身免疫機(jī)能紊亂是TAO發(fā)病機(jī)制的5個(gè)學(xué)說(shuō)中最具有權(quán)威性的一個(gè)學(xué)說(shuō)，但是目前的研究只是進(jìn)一步證明了自身免疫機(jī)能紊亂在TAO

2、的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。 免疫抑制劑是否對(duì)TAO有一定的效果?國(guó)內(nèi)外關(guān)于在TAO動(dòng)物模型上應(yīng)用免疫抑制劑的研究極少有報(bào)道。本課題是對(duì)免疫抑制劑在TAO動(dòng)物模型的應(yīng)用情況進(jìn)行初步研究，初步判定免疫抑制劑是否能在TAO動(dòng)物模型上起到阻止病情發(fā)展的作用，為探索一個(gè)治療TAO的新方法提供理論依據(jù)。 首先應(yīng)用月桂酸鈉成功的建立TAO大鼠模型。使用大白鼠55只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組5只、模型對(duì)照組25只和環(huán)磷酰胺組25只。在顯微鏡下完

3、成手術(shù)，向股動(dòng)脈遠(yuǎn)心端注入月桂酸鈉溶液。環(huán)磷酰胺組大鼠予以環(huán)磷酰胺50mg/kg，腹腔注射，1次/每周，共4周。于四周后處死動(dòng)物，留取標(biāo)本。 通過(guò)免疫組化和RT-PCR的方法來(lái)觀察VEGF的表達(dá)情況，通過(guò)Ⅷ因子(vonWillebrendFactor，vWF)免疫組化染色顯示毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，測(cè)量微血管密度(MVD)并以此推斷機(jī)體形成側(cè)支動(dòng)脈的能力。對(duì)兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果表明：動(dòng)物模型制作是成功的，模型組TAO大

4、鼠造模側(cè)后肢缺血性病變較環(huán)磷酰胺組大鼠模型的病變嚴(yán)重，而VEGF免疫組化檢測(cè)結(jié)果和RT-PCR檢測(cè)結(jié)果提示：環(huán)磷酰胺組TAO大鼠造模側(cè)后肢內(nèi)收肌標(biāo)本VEGF陽(yáng)性表達(dá)與模型組TAO大鼠造模側(cè)后肢內(nèi)收肌標(biāo)本VEGF陽(yáng)性表達(dá)無(wú)顯著性差異，vWF免疫組化檢測(cè)同樣發(fā)現(xiàn)環(huán)磷酰胺組TAO大鼠造模側(cè)后肢內(nèi)收肌標(biāo)本MVD與模型組TAO大鼠造模側(cè)后肢內(nèi)收肌標(biāo)本MVD無(wú)顯著性差異。 從本試驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn)：環(huán)磷酰胺對(duì)TAO大鼠模型有一定的治療作用，可以明