血紅素加氧酶-1在大鼠肢體缺血再灌注性肺損傷及預處理中的作用.pdf

1、目的：觀察血紅素加氧酶-1(hemeoxygenase-1，HO-1)在缺血預處理下對大鼠肢體缺血再灌注性肺損傷的變化，闡明缺血預處理肺保護作用的相關(guān)機制；進一步闡述尿蛋白酶抑制劑(urinarytrypsininhibitor，UTI)與HO-1兩種內(nèi)源性保護系統(tǒng)的相互關(guān)聯(lián)，為該藥的臨床應(yīng)用提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
　　 方法：雄性SD大鼠64只，隨機分為四組：假手術(shù)組(S)，缺血再灌注組(I/R)缺血預處理組(IPR)及尿蛋

2、白酶抑制劑（烏司他?。╊A處理組(UTI)。假手術(shù)組(S，n=16)：僅鈍性分離雙側(cè)腹股溝三角處股動脈，不予夾閉，作為時間對照，術(shù)中使用公斤體重1/3-1/2的水合氯醛維持麻醉至無體動反應(yīng)。缺血再灌注組(I/R，n=16)：股動脈夾閉前30分鐘頸內(nèi)靜脈給予生理鹽水1ml作為溶劑對照。制作雙下肢缺血2小時、再灌注2小時(n=8)和4小時(n=8)模型。缺血預處理組(IPR，n=16)：股動脈夾閉前30分鐘實施缺血5分鐘、再灌注5分鐘，循環(huán)3

3、次后余同I/R組。烏司他丁處理組(UTI)：股動脈夾閉前30分鐘，頸內(nèi)靜脈給予公斤體重50000U的烏司他丁，再灌注前10分鐘再給予公斤體重50000U的烏司他丁，余同I/R組。分別于再灌注2小時和4小時末取大鼠左肺組織制備石蠟標本，行組織學檢查及用免疫組化法測定HO-1的半定量和定位表達(n=8)，新鮮肺組織測量濕/干比，免疫印跡法測右肺組織HO-1蛋白表達水平(n=8)。
　　 結(jié)果：
　　 1、形態(tài)學變化：I/R組

4、可見肺組織水腫、毛細血管擴張充血、血管周圍間隙增大、肺間質(zhì)有大量的炎癥細胞浸潤，部分肺泡腔可見出血，并伴局部肺不張。IPR組及UTI組的肺組織損傷病理改變明顯減輕，較S組無統(tǒng)計學差異。
　　 2、肺水腫：I/R組肺組織肺濕/干比明顯增加，形態(tài)學也可見間質(zhì)水腫表現(xiàn)，與S組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），IPR組及UTI組兩組再灌注2、4小時肺濕/干比都較I/R組明顯減少（P＜0.05），再灌注4小時更為明顯（P＜0.05），與S

5、組相比差異無統(tǒng)計學意義。
　　 3、HO-1表達的變化：免疫印跡：與S組相比，I/R組再灌注2、4小時可見HO-1保護蛋白有少量的表達（P＜0.01），IPR組及UTI組明顯上調(diào)HO-1的表達并達到保護肺損傷的作用（P＜0.01），與再灌注2小時相比，再灌注4小時仍可見其高表達狀態(tài)（P＜0.05）。免疫組化蛋白半定量表達結(jié)果與免疫印跡相符合，并可觀察到HO-1表達的位置主要在肺支氣管上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞、炎癥細胞，肺泡上皮細胞