黃瓜4種α-半乳糖苷酶的Southern雜交及表達(dá)分析.pdf

1、黃瓜韌皮部中的碳水化合物主要以水蘇糖的形式進(jìn)行運(yùn)輸，但其果肉中只含有蔗糖、葡萄糖和果糖，黃瓜體內(nèi)水蘇糖生物分解的第一個水解步驟由a-半乳糖苷酶催化完成。為了研究黃瓜體內(nèi)水蘇糖卸出的具體機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)室前期已經(jīng)克隆了2種酸性a-半乳糖苷酶基因和2種堿性a-半乳糖苷酶基因的cDNA全長序列。為了進(jìn)一步研究這些酶在黃瓜水蘇糖卸出過程的具體作用，本實(shí)驗(yàn)在Southern雜交探明各個基因在黃瓜基因組中拷貝數(shù)的基礎(chǔ)上，一方面測定了黃瓜果實(shí)在不同發(fā)育階

2、段和晝夜周期中的生長速度，另一方面通過Northern雜交檢測了相應(yīng)時期各種酶mRNA的表達(dá)量，并研究了兩者之間的相關(guān)性。所得結(jié)果如下： 1.黃瓜2種酸性a-半乳糖苷酶基因和堿性a-半乳糖苷酶I基因在黃瓜基因組中均以單拷貝形式存在，而堿性a-半乳糖苷酶II基因則以低拷貝的形式存在。 2.經(jīng)Northem雜交分析4種a-半乳糖苷酶在果實(shí)發(fā)育的各時期的晝夜周期中的表達(dá)量與果實(shí)生長速度之間的關(guān)系，表明2種酸性a-半乳糖苷酶與黃