甜菊苷的微生物酶法轉化及大孔樹脂吸附分離研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、甜菊糖中主要含甜菊苷(SS)萊鮑迪苷A(RA)兩種成分。其中含量較低的萊鮑迪苷A(RA)是甜菊糖中呈味品質最好的組分;甜菊苷(SS)含量較高,但因其味質中的后苦味影響了甜菊糖作為天然甜味劑的廣泛應用。由于SS與RA在化學結構和物理性質上非常接近,使RA與SS的分離非常困難。 環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶(CGTase)具有將SS轉化為RA改良甜菊糖味質的功效,本工作在選育了高產(chǎn)環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶的芽孢桿菌基礎上,對產(chǎn)酶活力較高的Sx芽

2、孢桿菌進行了菌種鑒定,結合菌體與菌落形態(tài)特征以及16SrRNA序列分析,鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。在用Sx菌產(chǎn)環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶的發(fā)酵中,使用玉米淀粉1.0%,豆粕粉2%,Mg2SO4·7H2O 0.02%,K2HPO4 0.1%培養(yǎng)基,于30℃,pH6.5,裝液量50mL,,220rpm,60h的條件下,CGTase酶活性可達5596U/mL。對所產(chǎn)生的CGTase酶性質研究表明:該酶的最適溫度為40

3、℃,最適pH值為6.5,對溫度及pH的適應范圍均較寬,分別為30℃-50℃及pH5.5-9.0。 用CGTase酶對SS的轉化研究表明,含SS>50%的甜菊總苷溶液在50℃恒溫條件下轉化48h后,甜菊苷溶液中的RA/SS比值從轉化前的0.45上升為0.53。 本工作利用大孔樹脂對RA和SS的吸附選擇性,以分離甜菊糖的這兩種主要成分。在研究大孔吸附樹脂對甜菊糖各組分的吸附選擇性等性能的基礎上,篩選了對RA和SS吸附選擇性差

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