極地微生物對龍膽苦苷和芍藥苷的生物轉化研究.pdf

1、微生物轉化就是利用微生物代謝過程中產生的酶對外源物質進行結構修飾和改造的化學反應。與化學方法相比，它具有選擇性高、條件溫和、無污染、成本低、副產物少等優(yōu)點。利用微生物作為生物催化劑可以對天然產物的結構進行結構修飾，得到一些結構新穎的化合物，以供藥物篩選之用。同時，微生物轉化也常常作為代謝研究的一種重要工具，在體外預測藥物在動物體內代謝的情況。
　　多種研究表明，糖苷類藥物需經微生物轉化為苷元后方能產生藥效，利用微生物發(fā)酵過程中產生

2、的酶系，建立苷類藥物體外轉化模型，將苷類物質轉化為相應的苷元，能有效提高活性成分的生物利用度。已有研究報道β-D-葡萄糖苷酶在龍膽苦苷和芍藥苷的生物轉化過程中起到非常重要的作用。所以，本文首先將來源于極地區(qū)域的土壤樣品為供試土樣，通過土壤微生物分離方法，借助七葉靈顯色反應，從極地土樣中分離出若干株產β-葡萄糖苷酶的真菌菌株，用于后續(xù)的微生物轉化實驗。
　　其次，本研究分別以龍膽苦苷和芍藥苷為底物，利用上述分離出的真菌菌株進行微生物

3、轉化篩選，發(fā)現(xiàn)菌株Z1-4的轉化效率最高。在此基礎上將反應規(guī)模擴大，乙酸乙酯萃取濃縮，硅膠柱和葡聚糖凝膠分離多次純化，并用核磁共振、液質聯(lián)用等技術對其結構進行了鑒定。其中龍膽苦苷得到兩個轉化產物，其中一個為新化合物;芍藥苷的轉化產物鑒定出底物結構上脫離的苯甲酸，其他轉化產物還需進一步的鑒定。
　　綜合菌株Z1-4的形態(tài)學觀察結果和真菌18S、ITS分子生物學鑒定技術，發(fā)現(xiàn)Z1-4的18S序列與Genbank數(shù)據(jù)庫ABD48284.