人參果皂苷的微生物轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、人參果為五加科植物人參（Panax ginseng C．A．Meyer）的成熟果實(shí)。隨著人參地上部分利用的研究進(jìn)展，人參果具有高含量的人參皂苷和顯著的生理活性，已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。本研究以名貴中藥人參的果實(shí)為原料，生物體系選擇上，主要以叢毛紅曲霉、銹色紅曲霉、巴克紅曲霉、橙色紅曲霉、白地霉等5種菌株為主，在底物選擇方面，則以人參皂苷中某些單體皂苷含量較大的人參果漿為首選，搖瓶液體發(fā)酵研究人參皂苷生物轉(zhuǎn)化報(bào)道較少，以上菌種發(fā)酵轉(zhuǎn)化

2、人參皂苷迄今尚未見系統(tǒng)的報(bào)道。近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人參皂苷的生物合成重又引起人們的研究熱情，并從基因水平上試圖闡明人參皂苷生物合成途徑。 本研究將利用人參果漿及其發(fā)酵液液體發(fā)酵方法從人參總皂苷含量的變化、單體皂苷組成比例等方面進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。將人參果汁經(jīng)過鈷60輻射滅菌后分別接入?yún)裁t曲霉、銹色紅曲霉、巴克紅曲霉、橙色紅曲霉、白地霉等5種菌株進(jìn)行微生物發(fā)酵，通過正交實(shí)驗(yàn)確定晟佳發(fā)酵工藝條件，最適pH為7．0，

3、最佳裝液量為120ml，最適溫度為30℃，最適轉(zhuǎn)速為120 rpm。得到人參果漿發(fā)酵液，總皂苷含量最高的是發(fā)酵14天的白地霉，果漿原汁總皂苷含量為3．565mg/ml，發(fā)酵后達(dá)到4．366mg/ml，總苷含量高出果漿原汁22．47％。通過大孔吸附樹脂柱富集人參果總皂苷，通過靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)4種大孔吸附樹脂粗篩，選定了吸附量較大的樹脂D101。并對(duì)樹脂D101進(jìn)行了吸附pH、解析乙醇濃度、解析pH值等進(jìn)行了初步的探討，得出了最佳工藝：人參果

4、漿發(fā)酵液pH6．5達(dá)到最大吸附量，以pH為7的70％乙醇為洗脫劑，流速為6ml/min可達(dá)到最大解析率56．89％有機(jī)溶劑提取、萃取、大孔吸附樹脂層析、硅膠柱層析等常規(guī)的植物化學(xué)方法和技術(shù)手段通過多種不同的提取、分離工藝路線，從人參果中分得5個(gè)單體化合物，并結(jié)合HPLC方法，對(duì)人參果漿原汁及發(fā)酵液中單體皂苷進(jìn)行含量測(cè)定。 這些工作的完成，為人參皂苷生物轉(zhuǎn)化及生物合成提供新方法、新途徑，對(duì)深入研究人參皂苷生物轉(zhuǎn)化、生物合成機(jī)理、新